維生素A在體內轉化為11-順式視黃醛后,與視網膜特定細胞中的視蛋白結合成視紫紅質。視紫紅質接受光信號后,11-順式視黃醛轉變為全反式視黃醛,視紫紅質構象發生變化,激活細胞內的信號通路,最終產生視覺。全反式視黃醛與視蛋白脫離,經復雜的轉運和酶促反應,再度轉變為11-順式視黃醛而被重復利用。最新研究表明,一種G蛋白偶聯受體RGR可能參與了視覺產生的某些過程。為研究RGR的作用機理,某研究小組利用基因工程培育出含RGR反義基因(反義基因是通過原基因反向連接在載體的啟動子和終止子之間,其轉錄出的mRNA與原基因轉錄出的mRNA互補配對)的轉基因小鼠(rgr),研究該基因的功能。回答下列問題:

(1)為構建RGR反義基因重組載體,需先設計引物,通過PCR技術特異性擴增RGR基因。為使PCR產物能被限制酶切割,需在引物上添加相應的限制酶識別序列,即在引物A添加 BamHIBamHI限制酶識別序列,在引物B添加 EcoRIEcoRI限制酶識別序列。引物的化學本質一般是 DNADNA。
(2)培養轉基因小鼠過程中,將基因表達載體導入受體細胞常用的方法是 顯微注射法顯微注射法,常用的受體細胞是 受精卵受精卵選擇培養基中除有動物細胞培養的必需成分,還需要添加 四環素四環素起篩選作用。
(3)研究人員將正常小鼠(WT)和轉基因小鼠(rgr)都平均分成兩組,一組在黑暗中飼養12h,另一組在光照下飼養12h;隨后測定小鼠眼睛中11-順式視黃醛、全反式視黃醛和視紫紅質的含量,結果如圖3所示。據圖分析,光照條件下RGR的作用機理可能是 RGR通過促進全反式視黃醛轉化為11-順式視黃醛,進而增加視紫紅質的形成RGR通過促進全反式視黃醛轉化為11-順式視黃醛,進而增加視紫紅質的形成。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】BamHI;EcoRI;DNA;顯微注射法;受精卵;四環素;RGR通過促進全反式視黃醛轉化為11-順式視黃醛,進而增加視紫紅質的形成
【解答】
【點評】
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發布:2024/11/22 9:30:1組卷:15引用:2難度:0.5
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