人血清白蛋白（HSA）在臨床上的需求量大，由于其來源有限和有生物污染的風險，重組人血清白蛋白（rHSA）成為其重要的替代品。科研人員將HSA基因轉入酵母菌細胞，獲得了重組人血清白蛋白。如圖為酵母菌基因改造以及工業化發酵生產rHSA的過程示意圖，其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ是四種不同的限制酶，其各自識別的酶切位點如下表所示。回答下列問題：
| 限制酶 | Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ |
| 識別序列及切割位點 |
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使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
。利用酵母菌細胞生產rHSA的過程利用了 基因重組
基因重組
的生物學原理。（2）構建的基因表達載體中需要使用酵母菌蛋白基因的啟動子AOX，原因是
AOX有利于HSA基因在酵母菌細胞內表達
AOX有利于HSA基因在酵母菌細胞內表達
。將受體酵母菌置于含有 四環素
四環素
的培養基中進行篩選培養，以獲得能表達HSA的細胞。（3）圖中啟動子處存在RNA聚合酶結合位點序列，推測該序列的作用是
調控HSA基因的轉錄
調控HSA基因的轉錄
。科研人員將HSA基因插入質粒中時，最好選擇限制酶 Ⅱ、Ⅳ
Ⅱ、Ⅳ
進行共同切割，原因是 質粒上沒有限制酶Ⅲ的識別位點；使用限制酶Ⅰ會使質粒的啟動子丟失或標記基因被破壞；使用兩種不同的限制酶可以避免目的基因和質粒反向連接
質粒上沒有限制酶Ⅲ的識別位點；使用限制酶Ⅰ會使質粒的啟動子丟失或標記基因被破壞；使用兩種不同的限制酶可以避免目的基因和質粒反向連接
（答出2點即可）。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；基因重組；AOX有利于HSA基因在酵母菌細胞內表達；四環素；調控HSA基因的轉錄；Ⅱ、Ⅳ；質粒上沒有限制酶Ⅲ的識別位點；使用限制酶Ⅰ會使質粒的啟動子丟失或標記基因被破壞；使用兩種不同的限制酶可以避免目的基因和質粒反向連接
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：27引用：2難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
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2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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