在真核生物體內普遍存在一種針對外源RNA的RNA沉默機制來抵御病毒的入侵,其過程主要包括:真核細胞能識別入侵病毒的RNA使其成為雙鏈RNA,經(jīng)剪切加工后,來自雙鏈RNA中的一些單鏈RNA片段(siRNA)與其他蛋白質形成RNA誘導沉默復合體(RISC),該復合體可以特異性地與病毒RNA結合并將其降解。番木瓜是嶺南四大名果之一,由于其極易受單鏈RNA的環(huán)斑病毒侵染從而導致減產(chǎn)。研究人員將環(huán)斑病毒(HA株系)的衣殼蛋白基因導入番木瓜愈傷組織內,獲得了首個轉基因抗病毒品種R。回答下列問題。
(1)在獲取環(huán)斑病毒衣殼蛋白基因的過程中,研究人員需要從序列數(shù)據(jù)庫中獲取環(huán)斑病毒的衣殼蛋白基因序列信息,根據(jù)衣殼蛋白基因兩側保守區(qū)域設計出用于PCR反應的 引物引物。然后從環(huán)斑病毒中提取總RNA,經(jīng) 逆轉錄逆轉錄后得到DNA,作為PCR反應的 模板DNA模板DNA,最后用 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳方法鑒定PCR產(chǎn)物。
(2)當轉基因抗病毒品種R被環(huán)斑病毒促染后,相關的siRNA通過 堿基互補配對堿基互補配對原則與病毒RNA結合,經(jīng)過 誘導沉默復合體(RISC)誘導沉默復合體(RISC)對RNA的降解,抑制病毒增殖。
(3)品種R對HA株系的環(huán)斑病毒具有良好的抗性,但對我國華南地區(qū)的其他株系的環(huán)斑病毒抗性不強。導入環(huán)斑病毒(HA株系)基因y的品種Y對不同株系環(huán)斑病毒具有更廣譜的抗性。推測與衣殼蛋白基因相比,基因y 堿基序列更加保守(即不同病毒株系的y基因序列相同),作為目的基因導入番木瓜后,具有廣泛的病毒株系抗性堿基序列更加保守(即不同病毒株系的y基因序列相同),作為目的基因導入番木瓜后,具有廣泛的病毒株系抗性。
【答案】引物;逆轉錄;模板DNA;瓊脂糖凝膠電泳;堿基互補配對;誘導沉默復合體(RISC);堿基序列更加保守(即不同病毒株系的y基因序列相同),作為目的基因導入番木瓜后,具有廣泛的病毒株系抗性
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:28引用:3難度:0.5
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