大腸桿菌pUC118質粒的某限制酶唯一酶切序列，位于該質粒的lacZ基因中，lacZ基因中如果沒有插入外源基因，lacZ基因便可表達出β-半乳糖苷酶，當培養基中含有IPTG和X-gal時，X-gal便會被β-半乳糖苷酶水解成藍色，大腸桿菌將形成藍色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，帶有pUC118質粒的大腸桿菌便不能表達β-半乳糖苷酶，培養基中的X-gal不會被水解成藍色，大腸桿菌將形成白色菌落．pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因．左圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質粒示意圖．據圖回答下列問題：
（1）人體DNA的目的基因中不能不能（能或不能）含有大腸桿菌pUC118質粒的某限制酶唯一酶切序列．
（2）作為受體大腸桿菌應不含氨芐青霉素抗性基因（或對氨芐青霉素敏感）不含氨芐青霉素抗性基因（或對氨芐青霉素敏感），以方便篩選已導入重組質粒的受體大腸桿菌．為了增加導入成功率，取用Ca2+Ca2+溶液處理（可增加細菌細胞壁細胞壁的通透性）過的受體大腸桿菌，置于試管Ⅱ中，并加入在試管Ⅰ中制備好的DNA在試管Ⅰ中制備好的DNA．
（3）圖中的選擇培養基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養物質外，還應加入IPTG、X-gal、氨芐青霉素IPTG、X-gal、氨芐青霉素等物質，用以篩選導入了重組質粒的受體大腸桿菌．
（4）將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養基上培養，以檢測受體大腸桿菌是否導入重組質粒，請預測菌落的顏色，并分析結果：
①如果長出藍色菌落，說明自連的運載體pUC118質粒已轉入受體菌，但目的基因沒有接入運載體（或說明重組質粒沒導入受體大腸桿菌）如果長出藍色菌落，說明自連的運載體pUC118質粒已轉入受體菌，但目的基因沒有接入運載體（或說明重組質粒沒導入受體大腸桿菌）
②如果長出白色菌落，說明重組質粒已導入受體大腸桿菌如果長出白色菌落，說明重組質粒已導入受體大腸桿菌．
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】不能；不含氨芐青霉素抗性基因（或對氨芐青霉素敏感）；Ca2+；細胞壁；在試管Ⅰ中制備好的DNA；IPTG、X-gal、氨芐青霉素；如果長出藍色菌落，說明自連的運載體pUC118質粒已轉入受體菌，但目的基因沒有接入運載體（或說明重組質粒沒導入受體大腸桿菌）；如果長出白色菌落，說明重組質粒已導入受體大腸桿菌
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：9引用：1難度：0.5
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2難度：0.6