已知人類的某種遺傳病受基因a控制，基因純合時細胞內缺乏相應基因控制合成的蛋白質而表現癥狀，為探究基因a不能表達是否與其啟動子有關，將基因a的啟動子片段轉移到如圖所示的載體上，即插入熒光蛋白基因啟動子的位置，然后將其導入小鼠細胞內，根據能否調控熒光蛋白基因的表達，進行實驗研究。已知熒光蛋白基因表達后，在紫外線照射下動物會發生熒光反應?；卮鹣铝邢嚓P問題：
（1）為將基因a的啟動子片段連接到圖示載體上，科研人員選擇HindⅢ和EcoRⅠ兩種限制酶對基因a啟動子片段和載體進行切割，目的是 防止載體和啟動子片段自身環化、實現（基因a）啟動子片段的定向連接防止載體和啟動子片段自身環化、實現（基因a）啟動子片段的定向連接（答出兩點）。在基因表達載體的構建過程中還需要 DNA連接DNA連接酶的參與，該酶的作用是 將載體和啟動子片段連接起來將載體和啟動子片段連接起來。
（2）構建基因表達載體后利用 顯微注射顯微注射的方法將其導入小鼠的 受精卵受精卵中，將該細胞培養成早期胚胎的過程中，需將培養皿置于含 95%的空氣和5%CO295%的空氣和5%CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。
（3）為了獲得多個具有同種遺傳物質的小鼠，可對早期胚胎采取的具體操作是 選擇發育良好、形態正常的桑葚胚或囊胚進行均等分割選擇發育良好、形態正常的桑葚胚或囊胚進行均等分割，通過檢測 轉基因小鼠在紫外線照射下是否發生熒光反應轉基因小鼠在紫外線照射下是否發生熒光反應來確定基因a不能表達與啟動子是否有關。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】防止載體和啟動子片段自身環化、實現（基因a）啟動子片段的定向連接；DNA連接；將載體和啟動子片段連接起來；顯微注射；受精卵；95%的空氣和5%CO2；選擇發育良好、形態正常的桑葚胚或囊胚進行均等分割；轉基因小鼠在紫外線照射下是否發生熒光反應
【解答】
【點評】
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發布：2024/7/19 8:0:9組卷：2引用：2難度：0.6
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發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6