下表中列出了幾種限制酶識別序列及其割位點，圖一、圖二中箭頭表示相關限制酶的位點．請回答下列問題：
| 限制酶 | BamH I | HindⅢ | EcoR I | Sma I |
| 識別序列及切割位點 | ↓ GGATCC CCTAGG ↑ |
↓ AAGCTT TTCGAA ↑ |
↓ GAATTC CTTAAG ↑ |
↓ CCCGGG GGGCCC ↑ |
（1）一個圖一所示的質粒分子經Sma I切割前后，分別含有
0、2
0、2
個游離的磷酸基團．（2）若對圖一中質粒進行改造，插入Sma I 酶切位點越多，質粒的穩定性越
高
高
．（3）用圖中的質粒和外源DNA構建重組質粒，不能使用Sma I切割，原因是
SmaⅠ會破壞質粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
SmaⅠ會破壞質粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
．（4）與只是用EcoR I 相比較，使用BamH I和HindⅢ兩種限制酶同時處理質粒、外源DNA的優點在于可以防止
質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環化
質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環化
．（5）為了獲取重組質粒，將切割后的質粒與目的基因片段混合，并加入
DNA連接酶
DNA連接酶
．（6）重組質粒中抗生素抗性基因的作用是為了
鑒別和篩選含有目的基因的細胞
鑒別和篩選含有目的基因的細胞
．【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】0、2；高；SmaⅠ會破壞質粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因；質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環化；DNA連接酶；鑒別和篩選含有目的基因的細胞
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：12引用：3難度：0.1
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（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6