癌癥患者進行化療或放療之后,體內白細胞數量大幅度降低,可以注射粒細胞——巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)增加白細胞的數量。在自然條件下,此細胞因子的含量很低,很難獲得。某科研團隊將人的GMCSF基因導入大腸桿菌,大量生產重組GM-CSF,滿足了臨床需求。回答下列問題:
(1)從人血液中提取mRNA通過 反轉錄反轉錄過程獲得DNA,再以DNA為模板,利用 PCRPCR技術擴增GMCSF基因。使用該技術時,需加入耐高溫的DNA聚合酶,其作用是 催化合成DNA子鏈催化合成DNA子鏈。
(2)質粒通常含有抗生素抗性基因,該基因的作用是 便于將含入的GMCSF基因的受體細胞篩選出來便于將含入的GMCSF基因的受體細胞篩選出來。構建重組質粒過程中,人的GMCSF基因與質粒通常使用相同的限制酶進行切割,原因是 用相同的限制酶切割含目的基因的DNA片段和質粒能產生相同的末端,以便連接用相同的限制酶切割含目的基因的DNA片段和質粒能產生相同的末端,以便連接。
(3)大腸桿菌作為受體細胞的優點是 繁殖快、為單細胞、遺傳物質相對較少繁殖快、為單細胞、遺傳物質相對較少(答出2點)。在添加了該抗生素的培養基中得到了4個大腸桿菌菌落,從菌落中提取相關物質,進行進一步檢測,檢測結果如圖所示。根據結果顯示,應選擇 44號菌落進行擴大培養。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】反轉錄;PCR;催化合成DNA子鏈;便于將含入的GMCSF基因的受體細胞篩選出來;用相同的限制酶切割含目的基因的DNA片段和質粒能產生相同的末端,以便連接;繁殖快、為單細胞、遺傳物質相對較少;4
【解答】
【點評】
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發布:2024/6/27 10:35:59組卷:1引用:1難度:0.7
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