細胞的結構、代謝、遺傳等都與蛋白質的結構和功能密切相關，而對蛋白質的研究和應用，首先需要獲得高純度的蛋白質。從紅細胞中提取和分離血紅蛋白的流程圖如圖，回答下列問題：

（1）血紅蛋白因含有

血紅素

血紅素

（該物質中含Fe²⁺）而呈紅色，這有利于對提取過程進行監測。
（2）在進行樣品處理時首先要使用

生理鹽水

生理鹽水

，對紅細胞進行洗滌，目的是

去除雜蛋白（或血漿蛋白），以便于后續步驟的分離純化

去除雜蛋白（或血漿蛋白），以便于后續步驟的分離純化

。在該過程中，若

離心速度過高和時間過長

離心速度過高和時間過長

，則會使白細胞一同沉淀，達不到分離的效果。
（3）流程圖中步驟A、B分別是

血紅蛋白的釋放和粗分離

血紅蛋白的釋放和粗分離

。
（4）用凝膠色譜法純化蛋白質時，分子質量較大的蛋白質

先

先

（“先”或“后”）從層析柱中洗脫出來，裝填凝膠柱時，色譜柱不能有氣泡存在，原因是

氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分離效果

氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分離效果

。
（5）若要判斷提取分離的血紅蛋白是否達到要求，需要進行SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進行鑒定，其中的SDS的作用是

SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質分子原有的電荷量，掩蓋了不同種蛋白質間的電荷差別，使電泳遷移速率完全取決于分子的大小

SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質分子原有的電荷量，掩蓋了不同種蛋白質間的電荷差別，使電泳遷移速率完全取決于分子的大小

。