堿性蛋白酶廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)療等行業(yè)。為了實現(xiàn)低成本高產(chǎn)量的目標，研究人員通過誘變技術(shù)獲得高效分泌堿性蛋白酶的地衣芽孢桿菌，再利用基因工程手段將該地衣芽孢桿菌的堿性蛋白酶基因（Apr）導(dǎo)入大腸桿菌，構(gòu)建了表達胞外堿性蛋白酶的重組菌株。回答下列問題：
（1）在誘變技術(shù)處理的過程中，地衣芽孢桿菌發(fā)生了 基因突變基因突變（填“變異類型”）。由于該種變異具有 不定向性不定向性的特點，故誘變后還需經(jīng)過 篩選篩選才有可能獲得高效分泌堿性蛋白酶的芽孢桿菌。
（2）Apr基因兩端的核苷酸序列已知，如圖1所示。利用PCR技術(shù)擴增Apr基因所需要的引物是下列中的 ABAB。
A．5′-GGATCTAACGCGATACGC-3′
B．5′-CTCGAGCCGGAAATACTT-3′
C．5′-AAGTATTTCCGGCTCGAG-3′
D．5′-GCGTATCGCGTTAGATCC-3′
（3）PCR擴增產(chǎn)物的電泳結(jié)果顯示，除目的基因條帶外，還有2條非特異條帶，可能的原因有：①②①②（填序號），導(dǎo)致引物與模板中的非目的基因片段結(jié)合。
①引物序列較短
②引物和模板不完全配對
③復(fù)性溫度過高
（4）構(gòu)建基因表達載體時需要的工具酶有 限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶。如圖是2已構(gòu)建的重組表達載體pET-28b（+）-Apr示意圖，研究人員用XhoⅠ和NcoⅠ兩種酶（酶切位點見圖2，數(shù)字代表該位點與復(fù)制原點的距離）對重組菌株的DNA進行雙酶切，若得到約為 11101110bp和 52315231bp的DNA片段，則初步表明目的基因已成功導(dǎo)入到大腸桿菌細胞內(nèi)。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】基因突變；不定向性；篩選；AB；①②；限制酶、DNA連接酶；1110；5231
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：24引用：1難度：0.5
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1．科學家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）。可利用定點突變的DNA構(gòu)建基因表達載體，常用將基因表達載體導(dǎo)入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內(nèi)，并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為。科研人員通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募毎酥校?jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細胞內(nèi)是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
2．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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