回答與基因工程和植物克隆有關的問題：
HIV感染已成為威脅人類健康及社會發展的主要問題之一，臨床實驗證實，HIV殼體蛋白病毒樣顆粒能夠刺激機體產生特異的體液和細胞免疫。植物表達系統屬于真核細胞表達系統，利用植物生產重組蛋白具有很多優點，包括：降低攜帶動物性病原體的危險性，易于純化，不需特殊的運輸和儲藏條件，植物培養基價格低廉降低生產成本等，因此被認為是一個比微生物或動物更理想的蛋白生產系統。科學家們將經過改造的融合基因轉入枸杞細胞，建立利用轉基因枸杞根系分泌表達特定HIV殼體蛋白的反應系統。
（1）通過長期研究后，科學家已經測定該融合基因的堿基序列，下面為利用PCR儀進行PCR的操作步驟請完善相關步驟內容。
a.按配方準備好各組分。
b.用微量移液器依次加入各組分。
c.進行離心離心，使反應液集中在微量離心管底部。
（2）若采用農桿菌轉化法導入目的基因，需先將融合基因插入農桿菌Ti質粒的控制質粒DNA轉移的基因控制質粒DNA轉移的基因中，再通過農桿菌的侵染將重組DNA分子轉入枸杞細胞中。此過程中影響轉化效率的因素除了溫度、培養時間等環境因素外還有農桿菌的種類、數量農桿菌的種類、數量、受體細胞的基因型受體細胞的基因型。（答出2點即可）將成功導入目的基因的枸杞細胞進行植物組織培養前需將其轉入添加抗生素抗生素的培養基中培養，以除去附著的農桿菌。枸杞根系分泌表達HIV殼體蛋白的缺點是根系的生長較為緩慢，為了獲得大量表達產物，可以對相應細胞進行液體懸浮培養液體懸浮培養。
（3）枸杞植株在多次繼代培養后可能會喪失細胞全能性的表達能力，可能是由于細胞或組織中的激素平衡激素平衡被打破，或細胞對外源生長物質的敏感性外源生長物質的敏感性發生改變。
【考點】細胞工程的原理——細胞的全能性．
【答案】離心；控制質粒DNA轉移的基因；農桿菌的種類、數量；受體細胞的基因型；抗生素；液體懸浮培養；激素平衡；外源生長物質的敏感性
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：28引用：1難度：0.7
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1．紅豆杉富含紫杉醇，是一種重要的抗癌藥物。請回答與紅豆杉組織培養及轉基因有關的問題：
（1）在進行紅豆杉愈傷組織誘導和培養時，最好取春季新長出的莖葉，經處理后才能接種到誘導培養基中進行培養。形成的愈傷組織細胞在顯微鏡下觀察通常是不定形態的，原因是。為增加愈傷組織的數量，可以將培養瓶中的愈傷組織切下，接種至新的相同培養基上進行。
（2）可從固體培養基中篩選生長良好的愈傷組織，接種至含液體培養基的三角瓶中在搖床上振蕩培養，細胞的生長速度和紫杉醇含量和培養的溫度、pH、光照條件、培養基中的營養物質及細胞遺傳特性有關外，還受的影響。在植物細胞不斷再培養的過程中容易發生（可遺傳變異類型）等變化，這會導致細胞全能性的喪失。
（3）將外源基因導入植物細胞有多種途徑：以經改造的農桿菌Ti質粒為，通過寄主感染受體植物的途徑將外源基因轉入受體細胞；也可通過將外源基因直接導入受體細胞；還可以將外源DNA包裹在人工合成的脂質體中，通過與融合完成細胞的轉化。發布：2024/6/27 10:35:59組卷：34引用：1難度：0.7 -
2．雞干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細胞因子，廣泛用于動物領域的抗病毒治療。科研人員將雞干擾素基因作為目的基因，構建重組質粒，導入煙草，以獲得抗病毒煙草。回答問題：
（1）已知雞干擾素基因的核苷酸序列，則可采用方法獲得目的基因，對其進行克隆常采用技術。
（2）重組質粒中應有RNA聚合酶識別和結合的部位，該部位稱為。
（3）由于細胞壁的存在，植物的組織培養和克隆有一定的難度，故常用（方法）將重組質粒導入煙草細胞的，再進行培養。待重新長出細胞壁，形成胚性細胞，此時，應該培養基中甘露醇的濃度，以利于胚性細胞繼續培養形成細胞團，然后經兩條途徑形成轉基因煙草植株。該轉基因煙草植株在多次繼代培養后，會（“保持”或“喪失”）細胞全能性的表達。
（4）若轉基因煙草植株對病毒的侵染表現出一定的抗性，但抗性較低，可能原因是。發布：2024/6/27 10:35:59組卷：34引用：1難度：0.7 -
3．以下可以說明細胞全能性的實驗是（ ）
發布：2024/12/31 1:30:1組卷：9引用：4難度：0.9