科研人員擬將已知的花色基因(目的基因)轉入矮牽牛的核基因組中,培育新花色的矮牽牛。請回答:
(1)目的基因擴增:為了獲得大量的目的基因,將其與含有抗生素抗性基因的質粒DNA形成重組DNA,再與經氯化鈣處理后成為 感受態感受態的大腸桿菌液混合,使重組DNA進入大腸桿菌,完成 轉化轉化實驗。將菌液涂布到固體培養基上進行篩選、鑒定,再接種至 液體培養基液體培養基進行擴大培養。
(2)形成重組DNA分子:從大腸桿菌中提取重組克隆載體,用限制酶分別切割含有目的基因的DNA用分別切割含目的基因的DNA和 農桿菌Ti質粒農桿菌Ti質粒,然后用DNA連接酶連接,形成重組DNA,并導入農桿菌。
(3)農桿菌侵染:取田間矮牽牛的幼嫩葉片,經 消毒消毒處理后剪成小片,在含有目的基因的農桿菌溶液中浸泡,使 目的基因目的基因轉移到矮牽牛葉片細胞中,并將其插入到受體細胞的染色體DNA上。取葉片細胞轉移至MS培養基上,促使細胞持續不斷地分裂形成 愈傷組織愈傷組織,再分化形成胚狀。
(4)鑒定是否含目的基因:提取葉片組織的DNA,經RCR擴增后的DNA樣品應加至電泳槽的 負極負極側(填“正極”或“負極”)進行電冰鑒定。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】感受態;轉化;液體培養基;農桿菌Ti質粒;消毒;目的基因;愈傷組織;負極
【解答】
【點評】
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發布:2024/4/20 14:35:0組卷:0引用:2難度:0.7
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