下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中標注了相關限制酶的酶切位點，其中切割位點相同的酶不重復標注。請回答下列問題：
| 限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
| 識別序列及切割位點 |
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（1）用圖中質粒和目的基因構建重組質粒，應選用
BclⅠ和HindⅢ
BclⅠ和HindⅢ
兩種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過 DNA連接
DNA連接
酶作用后獲得重組質粒。為了擴增重組質粒，需將其轉入經 氯化鈣
氯化鈣
處理過的 感受
感受
態的大腸桿菌中。（2）為了篩選出轉入了重組質粒的大腸桿菌，應在篩選平板培養基中添加
四環素
四環素
。平板上長出的菌落，常用PCR鑒定，所用的引物組成為圖2中的 引物甲和引物丙
引物甲和引物丙
。（3）若BamHI酶切的DNA末端與BclI酶切的DNA末端連接，連接部位的6個堿基對序列為
都不能
都不能
（填“都能”、“都不能”或“只有一種能”）切開。（4）若用Sau3AI切圖1質粒最多可能獲得
7
7
種大小不同的DNA片段。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】BclⅠ和HindⅢ；DNA連接；氯化鈣；感受；四環素；引物甲和引物丙；；都不能；7
；都不能；7【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：6引用：1難度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6