里氏木霉能高效表達并分泌纖維二糖水解酶Ⅰ(由cbh1基因編碼)等多種蛋白質,且不會產生對人體有害的毒素。中國科學家用里氏木霉作為受體細胞成功表達出Nb20(一種高親和性抗新冠病毒抗體)。操作流程如圖。

回答下列問題:
(1)纖維二糖水解酶Ⅰ是土壤微生物分解纖維素所需酶之一,推測里氏木霉在生態系統中屬于 分解者分解者。與大腸桿菌相比,采用里氏木霉作為工程菌可以生產結構相對復雜的藥用蛋白,推測其原因是 產物需經過內質網、高爾基體加工后分泌產物需經過內質網、高爾基體加工后分泌。
(2)pUC19質粒是經人工改造過的一種載體質粒,一般要利用 PCRPCR技術擴增以備用。
(3)Nb20編碼基因插入至cbh1基因啟動子下游的目的是 驅動轉錄、實現目的基因的高效表達并分泌目標蛋白驅動轉錄、實現目的基因的高效表達并分泌目標蛋白;構建的表達載體還需要的結構有 復制原點、標記基因、終止子復制原點、標記基因、終止子(答出兩點即可)。
(4)培養液中非目標蛋白較多,導致目標蛋白(Nb20)的純度和特異性不足,為提高目標蛋白的純度,從基因角度思考,改造里氏木霉可采取的思路是 對非目標蛋白質的編碼基因進行基因敲除對非目標蛋白質的編碼基因進行基因敲除。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】分解者;產物需經過內質網、高爾基體加工后分泌;PCR;驅動轉錄、實現目的基因的高效表達并分泌目標蛋白;復制原點、標記基因、終止子;對非目標蛋白質的編碼基因進行基因敲除
【解答】
【點評】
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發布:2024/6/27 10:35:59組卷:23引用:1難度:0.6
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