遺傳毒性物質常存在于被化學物質污染的水體中，可損傷生物的DNA，嚴重威脅人類健康。研究人員通過基因工程改造大腸桿菌，篩選出對遺傳毒性物質反應靈敏的工程菌株，用于水質檢測。
（1）已知圖1質粒中SRR基因表達產物可使大腸桿菌裂解。將“毒性響應啟動子”插入圖1所示質粒的P區，獲得基因工程改造的大腸桿菌，改造后的大腸桿菌在遇到遺傳毒性物質時，會發生裂解，據此可以推測“毒性響應啟動子”作用是

在遺傳毒性物質存在時，作為RNA聚合酶識別和結合部位，驅動基因（SRR基因）轉錄

在遺傳毒性物質存在時，作為RNA聚合酶識別和結合部位，驅動基因（SRR基因）轉錄

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（2）研究人員選取毒性響應啟動子sul與圖1質粒連接。圖2顯示了毒性響應啟動子sul內部存在的酶切位點。
①據圖1、圖2信息，克隆啟動子sul時，在其A端和B端應分別添加限制酶XhoI和SapI的識別序列，作用是

（兩側添加限制性內酶XhoⅠ和SapⅠ的識別序列后）即可用限制酶XhoⅠ和SapⅠ切割sul的克隆產物，以獲取到完整的sul啟動子（目的基因），同時質粒上也存在這兩個酶切位點，酶切后能保證啟動子sul與質粒的正確連接

（兩側添加限制性內酶XhoⅠ和SapⅠ的識別序列后）即可用限制酶XhoⅠ和SapⅠ切割sul的克隆產物，以獲取到完整的sul啟動子（目的基因），同時質粒上也存在這兩個酶切位點，酶切后能保證啟動子sul與質粒的正確連接

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②將重組后的表達載體導入大腸桿菌，置于含有

氨芐青霉素

氨芐青霉素

的選擇培養基中進行篩選、鑒定及擴大培養，最終獲得工程菌sul。
（3）研究人員繼續從其它菌中克隆出兩種毒性響應啟動子（imu、rec），用同樣的方法獲得工程菌，檢測不同處理下菌體密度相對值，以篩選最靈敏的檢測菌株。

表1					表2
相對值 時間（h）	對照	sul	imu	rec	對照	sul	imu	rec

①將3種工程菌和對照菌在LB培養基中培養一段時間后，表1檢測結果顯示

3種工程菌菌體數量增長趨勢與對照菌基本一致

3種工程菌菌體數量增長趨勢與對照菌基本一致

，說明工程菌在自然生長狀態下不會產生自裂解現象。
②上述菌株在LB培養基中生長2h時后加入遺傳毒性物質，每隔一段時間進行檢測菌體密度相對值，結果如表2。據表可知，3種工程菌均啟動了對遺傳毒性物質的響應，應選擇工程菌

轉入rec啟動子的菌株

轉入rec啟動子的菌株

作為最優檢測菌株，依據是

（加入有毒物質后）其中轉入rec啟動子的菌株在不同培養時長下菌體密度值都最低

（加入有毒物質后）其中轉入rec啟動子的菌株在不同培養時長下菌體密度值都最低

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