新冠病毒是一種單鏈RNA病毒，常用“熒光RT-PCR技術”進行檢測，方法是取檢測者的mRNA逆轉錄出cDNA，并大量擴增，時，用熒光標記的新冠病毒核酸探針來檢測PCR產物中是否含有新冠病毒的cDNA．請回答下列問題：
（1）“熒光RT-PCR技術”所用的試劑盒中通常都應該含有：

逆轉錄酶

逆轉錄酶

、

熱穩定性DNA聚合酶（Taq酶）

熱穩定性DNA聚合酶（Taq酶）

、熒光標記的核酸探針、引物、dNTP、緩沖體系。
（2）如果要同時擴增兩種基因，則試劑盒中的引物應該有

4

4

種。如圖1為新冠病毒的“ORFlab基因”對應的cDNA片段結構示意圖，則與之對應的引物結合的部位應該是圖中的

4、1

4、1

（子鏈延伸方向為其自身的5′→3′，用圖中數字作答）。若已知該基因的引物Ⅰ，能否依據其堿基序列設計出另一種引物Ⅱ？

不能

不能

，理由是

兩段引物的堿基序列沒有相關性（既不相同，也不互補）

兩段引物的堿基序列沒有相關性（既不相同，也不互補）

。

（3）在檢測過程中，隨著PCR的進行，反應產物不斷累積，“雜交雙鏈”熒光信號的強度也等比例增加。可通過熒光強度的變化監測產物量的變化從而得到一條熒光擴增曲線圖（如圖2）。

①“平臺期”出現的最可能的原因是

試劑盒中的原料、引物和探針數量一定，超出一定的循環數后，熒光標記的“雜交雙鏈”不再增加

試劑盒中的原料、引物和探針數量一定，超出一定的循環數后，熒光標記的“雜交雙鏈”不再增加

。
②理論上，在檢測過程中，有熒光標記的“雜交雙鏈”出現，則說明檢測結果呈

陽

陽

（填“陰”或“陽”）性，但為了保證檢測結果的準確性，一般要達到或超過閾值時才確診。現有兩個待檢樣本，檢測時都出現了上述形態的曲線，但甲的a點比乙的a點明顯左移。請給這種結果做出科學合理的解釋（試劑盒合格且正常，操作過程規范且準確）：

甲樣本中的新冠病毒含量更高達到閾值所需的循環數更少

甲樣本中的新冠病毒含量更高達到閾值所需的循環數更少

。