果汁制作是常用的水果加工技術之一，不僅可以緩解產銷矛盾，而且能夠提高產品的附加值。由霉菌發酵生產的果膠酶是食品加工業中使用量最大的酶制劑之一，被廣泛地應用于果汁加工業。圖為從黑曲霉菌中提取果膠酶的流程圖。回答下列有關問題：

（1）果膠酶包括果膠分解酶、多聚半乳糖醛酸酶和

果膠酯酶

果膠酯酶

。生產果汁時，為了使果膠酶得到充分的利用，除了控制好溫度和pH外，還需要控制好

果膠酶的用量

果膠酶的用量

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（2）圖中步驟A為

粗分離

粗分離

，該步驟常采用透析法，目的是

去除樣品中的雜質

去除樣品中的雜質

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（3）蛋白質純化可采用凝膠色譜法，分子量大的蛋白質

先

先

（填“先”或“后”）洗脫。在此過程中，凝膠色譜柱的裝填應緊密，不能有空隙，若有空隙在使用過程中會

攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，影響分離的效果

攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，影響分離的效果

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（4）為了使酶能夠被重復利用，節約成本，可將果膠酶進行固定化。一般來說，酶不適合采用包埋法進行固定，分析其原因是

酶分子小，容易從包埋材料中漏出

酶分子小，容易從包埋材料中漏出

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