乳鐵蛋白（lactoferrin,LF）是乳汁中一種重要的非血紅素鐵結合糖蛋白，具有廣譜抗菌、抗氧化、抗癌、調節免疫系統等強大生物功能，被認為是一種新型抗菌、抗癌藥物。如圖是研究人員開展人乳鐵蛋白（hLF）基因乳腺特異性表達載體構建及轉化研究，已知只有將過程①獲得的hLF基因置于BLG基因調控區下游，才能使其在動物乳腺的組織中特異性表達。請回答下列問題：
（1）過程①中為了獲取大量hLF基因，需要反轉錄后進行PCR擴增（RT-PCR），PCR時需要在引物的5'5'（填“3'”或“5'”）端添加相應的酶切位點，以便構建pEBL質粒。經過4輪循環后，得到的子代DNA分子中，不同時含有兩種引物的DNA分子占1818。
（2）通過過程①獲取的hLF基因需要插入到BLG基因之后最可能的原因是BLG基因含有啟動子能啟動hLF基因在動物乳腺組織中特異性表達BLG基因含有啟動子能啟動hLF基因在動物乳腺組織中特異性表達。
（3）要在含pEBL質粒、含pEB質粒和不含質粒的山羊乳腺上皮細胞中篩選出含pEBL質粒的山羊乳腺上皮細胞，請寫出簡要的思路先將被篩選的山羊乳腺上皮細胞置于含新霉素的培養液中培養一段時間，再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細胞，沒有綠色熒光的活細胞即是含pEBL質粒的山羊乳腺上皮細胞先將被篩選的山羊乳腺上皮細胞置于含新霉素的培養液中培養一段時間，再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細胞，沒有綠色熒光的活細胞即是含pEBL質粒的山羊乳腺上皮細胞。
（4）要獲得轉基因山羊，還需要將成功表達hLF的乳腺上皮細胞的細胞核移植到山羊的去核的卵母細胞去核的卵母細胞中，再借助早期胚胎培養和胚胎移植技術孕育出羊羔。胚胎移植程序中要對供、受體母畜進行同期發情處理，目的是使供、受體生殖器官的生理變化相同，為供體的胚胎移植入受體提供相同的生理環境使供、受體生殖器官的生理變化相同，為供體的胚胎移植入受體提供相同的生理環境。
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【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】5'；；BLG基因含有啟動子能啟動hLF基因在動物乳腺組織中特異性表達；先將被篩選的山羊乳腺上皮細胞置于含新霉素的培養液中培養一段時間，再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細胞，沒有綠色熒光的活細胞即是含pEBL質粒的山羊乳腺上皮細胞；去核的卵母細胞；使供、受體生殖器官的生理變化相同，為供體的胚胎移植入受體提供相同的生理環境
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【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：9引用：3難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7