科研人員將寒帶地區海魚體內的抗凍基因導入千禧果（一種番茄品種）細胞，成功培育出抗凍千禧果。如圖為培育過程中使用的 Ti質粒示意圖，其中 Vir區的基因活化能促進T-DNA的加工和轉移。回答下列問題：
（1）將抗凍基因的mRNA逆轉錄后，再進行PCR可獲得抗凍基因，該過程中所需要的酶是 逆轉錄酶、Taq酶逆轉錄酶、Taq酶。每次PCR循環分為3步。其中所需溫度最低的一步的目的是 使引物結合到互補DNA 鏈上使引物結合到互補DNA 鏈上。
（2）抗凍基因不能直接導入受體細胞，需要構建抗凍基因表達載體，構建抗凍基因表達載體的目的是 有利于抗凍基因在受體細胞中穩定存在，并遺傳給下一代；有利于抗凍基因在受體細胞中表達和發揮作用有利于抗凍基因在受體細胞中穩定存在，并遺傳給下一代；有利于抗凍基因在受體細胞中表達和發揮作用（答出1點）。
（3）選擇圖中 Ti質粒構建基因表達載體時，不能選擇限制酶Ⅱ切割 Ti質粒。原因是 限制酶Ⅱ會破壞Vir區基因限制酶Ⅱ會破壞Vir區基因。最好選擇限制酶 ⅢⅢ構建基因表達載體。
（4）為篩選成功導入抗凍基因的千禧果細胞，最好在培養基中添加 四環素四環素，將成功轉化的千禧果細胞誘導培育成植株，最后在 低溫（或寒冷）低溫（或寒冷）條件下篩選出具有抗凍性狀的千禧果植株。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉錄酶、Taq酶；使引物結合到互補DNA 鏈上；有利于抗凍基因在受體細胞中穩定存在，并遺傳給下一代；有利于抗凍基因在受體細胞中表達和發揮作用；限制酶Ⅱ會破壞Vir區基因；Ⅲ；四環素；低溫（或寒冷）
【解答】
【點評】
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發布：2024/7/4 8:0:9組卷：3引用：2難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
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2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6