某研究小組計劃通過多聚酶鏈式反應(PCR)擴增目的基因并用于構建轉基因工程菌,其擴增過程示意圖如下。回答下列問題:
(1)圖中“?”代表的溫度約為 5050℃。步驟1的目的是 使模板DNA的雙鏈解聚使模板DNA的雙鏈解聚。
(2)PCR過程中需要使用的酶是 耐高溫的DNA聚合酶耐高溫的DNA聚合酶,和人體內同種功能的酶相比,該酶的顯著特點是 可以在高溫條件下正常發揮酶的催化作用可以在高溫條件下正常發揮酶的催化作用。
(3)設計一對與MT基因兩端序列互補配對的引物(引物1和引物2),設計引物時需要避免引物之間形成 氫鍵氫鍵,而造成引物自連。若將一個目的基因通過PCR過程共進行5輪循環,則有 3131條DNA單鏈含引物1(或引物2)。
(4)PCR擴增時,復性溫度的設定是成敗的關鍵。復性溫度過高會破壞 引物與模板引物與模板的堿基配對。復性溫度的設定與引物長度、堿基組成有關,長度相同但 G、CG、C堿基含量高的引物需要設定相對更高的復性溫度。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】50;使模板DNA的雙鏈解聚;耐高溫的DNA聚合酶;可以在高溫條件下正常發揮酶的催化作用;氫鍵;31;引物與模板;G、C
【解答】
【點評】
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發布:2024/4/20 14:35:0組卷:2引用:3難度:0.6
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