tPA是一種臨床上用于治療心腦血栓類疾病的藥物，科研人員計劃用動物乳腺生物反應器生產tPA，但tPA并不是乳腺蛋白，因此在動物乳腺中的表達水平較低。生長激素（GH）可促進動物細胞增殖和乳腺生長發育及維持泌乳。研究人員通過構建具有GH基因和IPA基因的雙轉基因小鼠，探究GH能否促進外源目的基因tPA的表達。回答下列問題：
（1）為獲得轉基因小鼠，將tPA基因通過 顯微注射顯微注射的方法注入小鼠的 受精卵受精卵中，將發育成為tPA單轉基因個體；同理將tPA基因和GH基因同時注入獲得雙轉基因小鼠，選擇性別為 雌性雌性的個體作為后續研究對象。
（2）剪取轉基因小鼠的少量尾尖組織，提取基因組DNA進行PCR擴增，PCR反應體系中需加入特定的引物，引物的作用是 使耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）從引物3'端開始連接脫氧核苷酸使耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）從引物3'端開始連接脫氧核苷酸，擴增的產物再經過 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳技術來鑒定是否成功。
（3）圖1是兩種基因表達載體的部分示意圖，圖中CMV代表 乳腺中特異表達的基因乳腺中特異表達的基因的啟動子。利用PCR技術來檢測基因整合情況，若小鼠成功整合了tPA基因，則能擴增出多個大小為 560560bp的DNA片段。圖2中的1和2代表轉基因小鼠的兩種檢測結果，出現第 22種結果的小鼠為GH/tPA雙轉基因小鼠。
（4）選取處于泌乳期的GH/tPA雙轉基因和tPA單轉基因小鼠，統計分析兩種轉基因小鼠乳腺中tPA的表達情況，結果見下表。結果證明了 生長激素（GH）能夠促進tPA的表達生長激素（GH）能夠促進tPA的表達。
轉基因小鼠tPA表達情況分析表
| tPA單轉基因小鼠 | GH/tPA雙轉基因小鼠 | |
| 表達水平（μg/mL） | 16.3～82.5 | 112～423 |
【答案】顯微注射；受精卵；雌性；使耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）從引物3'端開始連接脫氧核苷酸；瓊脂糖凝膠電泳；乳腺中特異表達的基因；560；2；生長激素（GH）能夠促進tPA的表達
【解答】
【點評】
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發布：2024/7/17 8:0:9組卷：5引用：2難度：0.6
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（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6