M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達。現設計實驗,將外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通過核移植、胚胎培養和胚胎移植等技術獲得M基因失活的轉基因克隆動物A,流程如圖所示。回答下列問題:
(1)在構建含有片段F的重組質粒過程中,將目的基因和質粒“縫合”在一起的工具酶是 DNA連接酶DNA連接酶。該酶據來源可以分為兩類,其中 T4DNA連接酶T4DNA連接酶既可以“縫合”粘性末端,又可以“縫合”平末端。將重組質粒導入成纖維細胞常用的方法是 顯微注射技術顯微注射技術。
(2)動物細胞培養液中通常需要添加一定量的 抗生素抗生素,以防止培養過程中的污染。在無菌、無毒等適宜環境中進行動物A成纖維細胞的原代和傳代培養時,需要定期更換培養液,目的是 清除代謝產物,防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害清除代謝產物,防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害。
(3)與胚胎細胞核移植技術相比,體細胞核移植技術的成功率更低,原因是 動物胚胎細胞分化程度低,恢復其全能性相對容易,而動物體細胞分化程度高,恢復其全能性十分困難動物胚胎細胞分化程度低,恢復其全能性相對容易,而動物體細胞分化程度高,恢復其全能性十分困難。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細胞,在形態上表現為 細胞體積小,細胞核大,核仁明顯細胞體積小,細胞核大,核仁明顯(答出兩點即可),功能上具有 發育的全能性發育的全能性。
(4)鑒定轉基因動物:以免疫小鼠的 BB淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合,篩選融合雜種細胞,制備M蛋白的單克隆抗體。
【答案】DNA連接酶;T4DNA連接酶;顯微注射技術;抗生素;清除代謝產物,防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害;動物胚胎細胞分化程度低,恢復其全能性相對容易,而動物體細胞分化程度高,恢復其全能性十分困難;細胞體積小,細胞核大,核仁明顯;發育的全能性;B
【解答】
【點評】
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發布:2024/4/20 14:35:0組卷:8引用:2難度:0.6
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