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          M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達。現設計實驗,將外源DNA片段F插入M基因的特定位置,再通過核移植、胚胎培養和胚胎移植等技術獲得M基因失活的轉基因克隆動物A,流程如圖所示。回答下列問題:
          (1)在構建含有片段F的重組質粒過程中,將目的基因和質粒“縫合”在一起的工具酶是
          DNA連接酶
          DNA連接酶
          。該酶據來源可以分為兩類,其中
          T4DNA連接酶
          T4DNA連接酶
          既可以“縫合”粘性末端,又可以“縫合”平末端。將重組質粒導入成纖維細胞常用的方法是
          顯微注射技術
          顯微注射技術

          (2)動物細胞培養液中通常需要添加一定量的
          抗生素
          抗生素
          ,以防止培養過程中的污染。在無菌、無毒等適宜環境中進行動物A成纖維細胞的原代和傳代培養時,需要定期更換培養液,目的是
          清除代謝產物,防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害
          清除代謝產物,防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害

          (3)與胚胎細胞核移植技術相比,體細胞核移植技術的成功率更低,原因是
          動物胚胎細胞分化程度低,恢復其全能性相對容易,而動物體細胞分化程度高,恢復其全能性十分困難
          動物胚胎細胞分化程度低,恢復其全能性相對容易,而動物體細胞分化程度高,恢復其全能性十分困難
          。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細胞,在形態上表現為
          細胞體積小,細胞核大,核仁明顯
          細胞體積小,細胞核大,核仁明顯
          (答出兩點即可),功能上具有
          發育的全能性
          發育的全能性

          (4)鑒定轉基因動物:以免疫小鼠的
          B
          B
          淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合,篩選融合雜種細胞,制備M蛋白的單克隆抗體。

          【答案】DNA連接酶;T4DNA連接酶;顯微注射技術;抗生素;清除代謝產物,防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害;動物胚胎細胞分化程度低,恢復其全能性相對容易,而動物體細胞分化程度高,恢復其全能性十分困難;細胞體積小,細胞核大,核仁明顯;發育的全能性;B
          【解答】
          【點評】
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          發布:2024/4/20 14:35:0組卷:8引用:2難度:0.6
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