人心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成,即肌鈣蛋白T(cTnT)、肌鈣蛋白I(cTnI)和肌鈣蛋白C(cTnC),其中cTnI在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標(biāo)。為制備抗cTnI的單克隆抗體,科研人員完成了以下過程。請回答相關(guān)問題:

(1)動物細(xì)胞培養(yǎng)時,可以用 胰蛋白酶(膠原蛋白酶)胰蛋白酶(膠原蛋白酶)酶處理動物組織,得到分散的組織細(xì)胞,培養(yǎng)基除了添加葡萄糖、氨基酸、生長因子等必要的營養(yǎng)成分外,往往還需加入一定量的 動物血清動物血清,以滿足動物細(xì)胞培養(yǎng)的營養(yǎng)需要。動物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5% CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行,CO2的作用是 維持培養(yǎng)液的pH維持培養(yǎng)液的pH。
(2)為了刺激小鼠機體產(chǎn)生更多的B淋巴細(xì)胞,每隔2周用cTnI作為 抗原抗原注射小鼠1次,共注射3次。最后一次免疫后第3天,取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合,常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是 聚乙二醇 (PEG)聚乙二醇 (PEG)。為了獲得雜交瘤細(xì)胞,應(yīng)將甲放在 (HAT)選擇性(HAT)選擇性培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。②過程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進行 抗體抗體檢測,之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測,并多次重復(fù)上述操作,其目的是篩選獲得抗cTnI抗體產(chǎn)量大、純度高的雜交瘤細(xì)胞丙。通過該技術(shù)獲得的單抗特點是 特異性強、靈敏度高特異性強、靈敏度高。
(3)酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測抗原的方法,具體原理如圖2示:
據(jù)圖分析,固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與同一抗原結(jié)合,這是由于不同抗體能與同一抗原表面的不同部位結(jié)合。該檢測方法中,酶標(biāo)抗體的作用是 與待測抗原結(jié)合,酶催化底物水解與待測抗原結(jié)合,酶催化底物水解。
【答案】胰蛋白酶(膠原蛋白酶);動物血清;維持培養(yǎng)液的pH;抗原;聚乙二醇 (PEG);(HAT)選擇性;抗體;特異性強、靈敏度高;與待測抗原結(jié)合,酶催化底物水解
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/5/21 8:0:9組卷:10引用:1難度:0.6
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1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱。科學(xué)家推測,抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進行了實驗。下列敘述正確的是( )
A.多次進行步驟①的目的是獲得更多已免疫的T淋巴細(xì)胞 B.經(jīng)選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)可得到既能大量增殖又能產(chǎn)生抗CD47抗體的雜交瘤細(xì)胞 C.實驗組中巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)體系需放入CO2培養(yǎng)箱 D.對照組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于實驗組可驗證上述推測 發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
2.雙特異性抗體是指一個抗體分子可以與兩個不同抗原或同一抗原的兩個不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時識別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請分析回答下列問題:
(1)與植物體細(xì)胞雜交相比,圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是
(2)對③篩選出的雜交瘤細(xì)胞,還需進行
(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
(4)與直接使用長春堿相比,將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對人體的副作用更小,原因是發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5 -
3.使用高效的細(xì)胞毒素藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時還會對健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用。抗體一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細(xì)胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機制如圖所示。下列敘述正確的是( )
A.單克隆抗體制備過程中需要使用Taq酶 B.ADC進入腫瘤細(xì)胞的運輸方式為協(xié)助擴散 C.溶酶體破裂導(dǎo)致其中的水解酶釋放,加速了腫瘤細(xì)胞死亡 D.細(xì)胞毒素具有與腫瘤細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生特異性結(jié)合的能力 發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7
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