人乳鐵蛋白（hLF）對細菌、真菌和病毒等有抑制作用。研究人員開展了如圖所示的有關人乳鐵蛋白基因的研究，圖中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相關限制酶的切割位點，neoR為新霉素抗性基因，BLG基因為β-乳球蛋白基因，GFP基因為綠色熒光蛋白基因。請回答下列問題：
（1）過程①中，不能從人肌肉細胞中提取RNA用于RT-PCR，是因為 hLF基因在人肌肉細胞中不表達hLF基因在人肌肉細胞中不表達。在RT-PCR過程中，加入的引物需在5′端添加 SalⅠSalⅠ和 BamHⅠBamHⅠ兩種限制酶的識別序列，以便于hLF基因插入pEB質粒中。
（2）過程②中，hLF基因插入BLG基因之后的目的是 使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細胞中表達使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細胞中表達。過程③中，使用人工膜制成的脂質體將重組質粒導入受體細胞，依據的主要原理是 生物膜具有流動性生物膜具有流動性。
（3）利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細胞 是否發綠色熒光是否發綠色熒光，以篩選出轉化成功的細胞。
（4）要獲得轉基因山羊，還需要將hLF基因成功表達的乳腺上皮細胞的細胞核移植到山羊 去核的卵母去核的卵母細胞中，再借助 早期胚胎培養早期胚胎培養和 胚胎移植胚胎移植技術培育出轉基因山羊。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】hLF基因在人肌肉細胞中不表達；SalⅠ；BamHⅠ；使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細胞中表達；生物膜具有流動性；是否發綠色熒光；去核的卵母；早期胚胎培養；胚胎移植
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/18 8:0:10組卷：9引用：1難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6