凝乳酶是奶制品加工中經常用到的一種酶，其傳統制備方法的產量遠遠不能滿足生產需要?？茖W家研究利用基因工程技術生產凝乳酶，其部分環節如圖所示。請據圖回答問題：
（1）從剛出生5天的小牛皺胃組織中提取總RNA，經 逆轉錄逆轉錄過程獲得總cDNA。通過PCR技術可在總cDNA中專一性擴增出凝乳酶基因，原因是 引物是根據凝乳酶基因的一段已知序列設計合成的（或引物能與凝乳酶基因的cDNA 特異性結合）引物是根據凝乳酶基因的一段已知序列設計合成的（或引物能與凝乳酶基因的cDNA 特異性結合）。
（2）過程①所使用的工具酶有 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。凝乳酶基因和質粒上均有NdeⅠ和XhoⅠ兩種酶的識別序列，分別是-C↓ATATG-，-C↓TCGAG-。用以上兩種酶分別切割目的基因和質粒，得到的黏性末端分別為 -TATA和-AGCT--TATA和-AGCT-。
（3）大腸桿菌作為凝乳酶基因受體細胞的主要優點有 繁殖快、易培養、產量高，且遺傳物質相對較少繁殖快、易培養、產量高，且遺傳物質相對較少（至少答出兩點）。用重組質粒轉化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞，原因是 未處理的大腸桿菌吸收質粒（外源DNA）的能力極弱未處理的大腸桿菌吸收質粒（外源DNA）的能力極弱。
（4）篩選出成功導入重組質粒的大腸桿菌，經多代培養后，仍能從大腸桿菌中提取出凝乳酶基因。據此判斷，你認為凝乳酶基因是否已在大腸桿菌中成功轉化？請說明你的觀點及理由：不能。理由是大腸桿菌中檢測到凝乳酶基因，說明目的基因已經成功導入大腸桿菌中，但不能說明凝乳酶基因已經成功轉化不能。理由是大腸桿菌中檢測到凝乳酶基因，說明目的基因已經成功導入大腸桿菌中，但不能說明凝乳酶基因已經成功轉化。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉錄；引物是根據凝乳酶基因的一段已知序列設計合成的（或引物能與凝乳酶基因的cDNA 特異性結合）；限制酶和DNA連接酶；-TATA和-AGCT-；繁殖快、易培養、產量高，且遺傳物質相對較少；未處理的大腸桿菌吸收質粒（外源DNA）的能力極弱；不能。理由是大腸桿菌中檢測到凝乳酶基因，說明目的基因已經成功導入大腸桿菌中，但不能說明凝乳酶基因已經成功轉化
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：6引用：1難度：0.7
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2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
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（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
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