健康人尿中只含有極微量的蛋白質(zhì)，若尿中蛋白質(zhì)含量過高，則稱為蛋白尿。除了腎臟疾病和累及腎臟的其他疾病會(huì)引起蛋白尿外，健康人在劇烈運(yùn)動(dòng)后也會(huì)出現(xiàn)暫時(shí)性蛋白尿。臨床上常用相關(guān)的試劑定性和定量檢測(cè)尿中蛋白質(zhì)。請(qǐng)利用對(duì)照的方法來設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行鑒定，以對(duì)比驗(yàn)證在某次劇烈運(yùn)動(dòng)后出現(xiàn)了蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)材料：試管、量筒、正常尿液、劇烈運(yùn)動(dòng)后的尿液、蒸餾水、檢測(cè)蛋白質(zhì)所需的某種試劑等。

（1）該實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)原理是：

雙縮脲

雙縮脲

試劑與蛋白質(zhì)反應(yīng)呈

紫

紫

色。
（2）第一步：取3潔凈的相同試管，分別標(biāo)號(hào)1、2、3：其中3號(hào)試管為實(shí)驗(yàn)組。
第二步：分別問3支試管中加入相應(yīng)實(shí)驗(yàn)液體。
1號(hào)：加2mL正常尿液：2號(hào)：加2mL蒸餾水；若3號(hào)：加

等量劇烈運(yùn)動(dòng)后的尿液

等量劇烈運(yùn)動(dòng)后的尿液

。
第三步：向3支試管內(nèi)分別加入相應(yīng)試劑，然后振蕩試管，使溶液混合均勻。
（3）第四步：實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果與可以得出的相應(yīng)結(jié)論。
①若

3號(hào)試管沒有出現(xiàn)紫色

3號(hào)試管沒有出現(xiàn)紫色

，則說明劇烈運(yùn)動(dòng)后不會(huì)出現(xiàn)暫時(shí)性尿蛋白。
②若

3號(hào)試管呈現(xiàn)紫色，而1、2號(hào)試管仍然是藍(lán)色

3號(hào)試管呈現(xiàn)紫色，而1、2號(hào)試管仍然是藍(lán)色

，則說明劇烈運(yùn)動(dòng)后會(huì)出現(xiàn)暫時(shí)性尿蛋白。
第五步：若劇烈運(yùn)動(dòng)后的尿液含有一定量的蛋白質(zhì)，實(shí)驗(yàn)小組運(yùn)用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行蛋白質(zhì)含量的檢測(cè)，步驟如下：制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，如表

各管加入試劑及蛋白質(zhì)含量	試管編號(hào)
	0	1	2	3	4	5
10mg/mL牛血清白蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液（mL）	0	0.2	0.4	0.6	0.8	1.0
蒸餾水（mL）	1.0	0.8	0.6	0.4	0.2	0
雙縮脲試劑（mL）	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0	4.0
蛋白質(zhì)含量（mg/mL）	0	2	4	6	8	10

樣品混合搖勻，在分光光度計(jì)中于540nm波長(zhǎng)處調(diào)零后，測(cè)定其吸光度值。
（4）0號(hào)管在本實(shí)驗(yàn)中的作用是

對(duì)照

對(duì)照

。
（5）某小組將劇烈運(yùn)動(dòng)后的尿液稀釋10倍后測(cè)定其吸光值為0.3399，據(jù)此可計(jì)算出該尿液蛋白質(zhì)濃度為

16.995

16.995

mg/mL。