家畜胚胎的性別鑒定技術對畜牧業的發展具有重要意義。巢式PCR擴增反應在兩次PCR反應中使用兩組不同引物，先使用外引物對目標區域DNA片段進行第一次PCR擴增，產生中間產物，然后使用內引物對中間產物進行第二次PCR擴增，產生目標產物。如圖1是式PCR工作原理示意圖，請回答：
（1）巢式PCR反應體系中需要加入模板、DNA聚合酶DNA聚合酶、dNTP（原料）dNTP（原料）、引物、Mg2+、緩沖液等。
（2）相比于常規PCR獲得的產物而言，巢式PCR獲得的產物特異性 更強更強，原因是如果利用外引物擴增產生了錯誤片段，再利用內引物擴增在錯誤片段上進行引物配對并擴增的概率 升高升高。
（3）巢式PCR通常在一個試管中進行第一階段反應，然后將中間產物等轉移到第二試管中進行第二階段反應，不在同一試管完成的主要原因是 防止引物配對特異性不強造成的非特異性擴增的污染防止引物配對特異性不強造成的非特異性擴增的污染。
（4）科研人員利用多重巢式PCR技術同時擴增Y染色體上雄性決定基因（SRY）和常染色體上的酪蛋白基因（CSN1S1），進行早期胚胎的性別鑒定，并將鑒定后的胚胎進行移植。表是主要實驗步驟，請完成表：
| 實驗目的 | 方法步驟要點 |
| 胚胎樣品DNA提取 | 選取囊胚的① 滋養層 滋養層 細胞提取DNA |
| PCR引物的設計和合成 | 根據牛的SRY和CSN1S1基因序列設計合成② 2 2 對引物 |
| PCR過程 | 預變性→③ 變性 變性 →退火→延伸 |
| 觀察擴增結果 | 電泳分析 |
| 受體牛④ 同期發情 同期發情 處理 |
對受體牛注射前列腺素 |
| 胚胎移植 | 將篩選出的胚胎移植到受體牛的子宮內 |
A
A
。可以確定1～5號中 1，2，4
1，2，4
號胚胎為雌性。（6）牛胚胎性別的鑒定除了可以利用PCR外，下列方法也可行的有
②③④
②③④
。①差速離心法
②核酸探針雜交法
③染色體核型分析法
④H-Y抗血清免疫學法（H-Y抗原編碼基因位于Y染色體上）
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】DNA聚合酶；dNTP（原料）；更強；升高；防止引物配對特異性不強造成的非特異性擴增的污染；滋養層；2；變性；同期發情；A；1，2，4；②③④
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：34引用：2難度：0.6
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發布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術屬于（填“基因工程”或“蛋白質工程”）。可利用定點突變的DNA構建基因表達載體，常用將基因表達載體導入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術，才能最終獲得轉基因植物。
（2）PCR過程所依據的原理是。利用PCR技術擴增，若將一個目的基因復制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內，并在受體細胞內維持穩定和表達的過程稱為。科研人員通過實驗研究發現培育的該轉基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學家利用生物技術將人的生長激素基因導入小鼠受精卵的細胞核中，經培育獲得一種轉基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術可檢測外源基因在小鼠細胞內是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉基因小鼠體細胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
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發布：2024/12/30 23:30:2組卷：4引用：3難度：0.7