圖1為胰島素基因結(jié)構(gòu)，圖2為pBR322質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)示意圖，圖中EcorⅠ、SmaⅠ、BamHⅠ和HindⅢ為限制酶，箭頭或線段所指為位點對應酶切位點。研究人員欲用此質(zhì)粒構(gòu)建胰島素基因的表達載體，培育能產(chǎn)生人胰島素的大腸桿菌。請回答下列相關問題：
（1）若要進行胰島素基因的擴增，常采用PCR技術(shù)，該技術(shù)的原理是 DNA雙鏈復制DNA雙鏈復制。使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是 加熱到90～95℃加熱到90～95℃。
（2）已知DNA新鏈的合成方向是5′→3′，若利用圖2中的質(zhì)粒構(gòu)建基因表達載體，應該選擇的引物為 引物4和引物5引物4和引物5。目前在PCR反應中使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因 Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活。
（3）在構(gòu)建基因表達載體時，選擇 BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ作為切割質(zhì)粒和目的基因的限制酶，可提高目的基因和運載體的正確連接效率，避免目的基因末端發(fā)生任意連接。
（4）成功構(gòu)建的基因表達載體應含有人胰島素基因、標記基因、啟動子及終止子等，其中標記基因的作用是 鑒別受體細胞中是否含有目的基因，并把含有目的基因的受體細胞篩選出來鑒別受體細胞中是否含有目的基因，并把含有目的基因的受體細胞篩選出來。
（5）限制酶的特點是 能夠識別雙鏈DNA分子中的某種特定序列，并在特定位點切割DNA分子能夠識別雙鏈DNA分子中的某種特定序列，并在特定位點切割DNA分子。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】DNA雙鏈復制；加熱到90～95℃；引物4和引物5；Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活；BamHⅠ和HindⅢ；鑒別受體細胞中是否含有目的基因，并把含有目的基因的受體細胞篩選出來；能夠識別雙鏈DNA分子中的某種特定序列，并在特定位點切割DNA分子
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：13引用：1難度：0.4
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1．下列有關基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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2．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
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