研究人員將抗鹽基因轉入普通煙草培育出抗鹽煙草，該過程所用的質粒與含抗鹽基因的DNA上相關限制酶的酶切位點分別如圖1、圖2所示。限制性內切核酸酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ，它們識別的堿基序列和酶切位點分別為G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。圖3表示該過程中利用含目的基因的農桿菌進行轉化作用的示意圖。
（1）圖1質粒中沒有標注出來的基本結構是 復制原點復制原點。
（2）用圖中質粒和目的基因構建基因表達載體時，可以用限制酶BamHⅠ切割質粒，用限制酶Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段，可以這樣做的原因是這兩種限制酶可以 目的基因應位于啟動子和終止子之間；且為了防止目的基因和運載體的任意連接，不采用同種限制酶，破壞Y抗生素基因更加有利于目的基因的檢測與鑒定，不用圖中的HindⅢ，BamHⅠ、BclⅠ的識別序列包含Sau3AⅠ的識別序列，因此應選用限制酶BamHⅠ切割質粒，選用Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段目的基因應位于啟動子和終止子之間；且為了防止目的基因和運載體的任意連接，不采用同種限制酶，破壞Y抗生素基因更加有利于目的基因的檢測與鑒定，不用圖中的HindⅢ，BamHⅠ、BclⅠ的識別序列包含Sau3AⅠ的識別序列，因此應選用限制酶BamHⅠ切割質粒，選用Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段。限制酶切斷的是DNA分子中特定部位的兩個脫氧核苷酸之間的 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵，該過程還需要水作為反應物。
（3）將上述切開的質粒與目的基因混合，加入DNA連接酶連接后，導入受體細胞（不考慮基因突變），受體細胞的類型包含 ABDABD。
A.抗X、抗Y
B.抗X、不抗Y
C.不抗X、抗Y
D.不抗X、不抗Y
（4）圖3過程 ①①（填序號）中發生了基因重組，過程②、③所用的培養基中，通常要調控好 生長素和細胞分裂素生長素和細胞分裂素兩類激素的比例。
（5）鑒定抗鹽轉基因煙草是否抗鹽的方法是 用一定濃度鹽水澆灌轉基因幼苗或將其移栽到鹽堿地中觀察其生長狀態用一定濃度鹽水澆灌轉基因幼苗或將其移栽到鹽堿地中觀察其生長狀態，觀察轉基因煙草的生長狀況。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】復制原點；目的基因應位于啟動子和終止子之間；且為了防止目的基因和運載體的任意連接，不采用同種限制酶，破壞Y抗生素基因更加有利于目的基因的檢測與鑒定，不用圖中的HindⅢ，BamHⅠ、BclⅠ的識別序列包含Sau3AⅠ的識別序列，因此應選用限制酶BamHⅠ切割質粒，選用Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段；磷酸二酯鍵；ABD；①；生長素和細胞分裂素；用一定濃度鹽水澆灌轉基因幼苗或將其移栽到鹽堿地中觀察其生長狀態
【解答】
【點評】
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