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          亞麻酸(ALA)能夠促進卵母細胞體外成熟和囊胚發育。為了給水牛體外胚胎產業化生產中合理使用亞麻酸提供理論依據,科研人員研究了不同濃度的亞麻酸對水牛卵母細胞體外成熟、早期胚胎發育的影響,分析回答:
          ①卵母細胞的收集和體外培養:從屠宰場水牛的卵巢中收集并處理卵母細胞,隨機分成5組,分別置于不同濃度亞麻酸的培養液中,在39℃、5%CO2的培養箱中培養22~24h。
          ②卵母細胞成熟判斷:在顯微鏡下觀察卵母細胞,判斷其是否成熟,統計結果如表1。
          ③體外受精:在受精溶液中進行體外受精后,用顯微鏡觀察判斷是否完成受精。
          ④早期胚胎培養:將受精卵移入胚胎培養液中培養44~48h后檢查分裂情況,每隔48h更換一次培養液,第5~9天觀察囊胚發育情況,統計結果如表2。
          表1亞麻酸對水牛卵母細胞體外成熟的影響
          ALA濃度/μmol?L-1 卵母細胞數 核成熟卵子數
          0 229 137
          10 201 133
          50 227 166
          100 215 137
          200 215 135
          表2亞麻酸對水牛早期胚胎發育的影響
          ALA濃度/μmol?L-1 培養卵數 分裂數 囊胚數
          0 309 171 75
          10 325 182 82
          50 292 185 97
          100 310 188 84
          200 231 145 68
          (1)步驟①中卵母細胞需培養至
          MII中期(減數第二次分裂中期)
          MII中期(減數第二次分裂中期)
          (時期)。
          (2)步驟②中,成熟卵母細胞內染色體的行為特征是
          染色體的著絲點排列在赤道板上
          染色體的著絲點排列在赤道板上
          。步驟③中,采集的精子在受精之前還需進行的處理是
          精子獲能處理
          精子獲能處理
          ,判斷是否受精的依據(標志)是
          在卵細胞膜和透明帶的間隙可否觀察到兩個極體
          在卵細胞膜和透明帶的間隙可否觀察到兩個極體

          (3)步驟④中,受精卵經過
          卵裂期、桑葚胚
          卵裂期、桑葚胚
          (時期)發育成囊胚,培養過程定期更換培養液的目的有
          清除有害代謝產物、補充營養物質
          清除有害代謝產物、補充營養物質

          (4)根據實驗數據分析,亞麻酸溶液為200μmol?L-1時,對水牛卵母細胞體外成熟和囊胚發育起
          促進
          促進
          作用。
          (5)本實驗結果表明,
          50μmol?L-1
          50μmol?L-1
          的亞麻酸對水牛卵母細胞體外成熟和囊胚發育都較有利,其判斷依據是
          核成熟卵子數占卵母細胞的比例較高,囊胚數占培養卵數的比例較高
          核成熟卵子數占卵母細胞的比例較高,囊胚數占培養卵數的比例較高

          【答案】MII中期(減數第二次分裂中期);染色體的著絲點排列在赤道板上;精子獲能處理;在卵細胞膜和透明帶的間隙可否觀察到兩個極體;卵裂期、桑葚胚;清除有害代謝產物、補充營養物質;促進;50μmol?L-1;核成熟卵子數占卵母細胞的比例較高,囊胚數占培養卵數的比例較高
          【解答】
          【點評】
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