普通棉花中β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2）表達出的3-甘露糖苷酶能催化半纖維素降解，使棉纖維長度變短。為了培育長絨棉，科研人員構建了反義GhMnaA2基因表達載體，獲得了轉基因長絨棉新品種，具體過程如圖所示，SmaⅠ，NotⅠ，HindⅢ和BamHⅠ為酶切位點，LB為T-DNA左邊界，RB為T-DNA右邊界。回答下列問題：
（1）過程①中不用限制酶NotⅠ的原因是 限制酶NotI會破壞目的基因，且質粒上沒有NotI的切割位點限制酶NotI會破壞目的基因，且質粒上沒有NotI的切割位點。GhMnaA2的序列中包含內含子等序列，可增大重組質粒的分子量，使導入效率降低，請提出一個解決此問題的方案：從棉花細胞中提取GhMnaA2的mRNA，逆轉錄獲得GhMnaA2的cDNA從棉花細胞中提取GhMnaA2的mRNA，逆轉錄獲得GhMnaA2的cDNA。
（2）過程②中在培養基中添加 抗生素抗生素可將含有重組質粒的農桿菌篩選出來。反義表達載體T-DNA區段的 E6啟動子和GhMnaA2基因E6啟動子和GhMnaA2基因片段整合到棉花細胞的染色體中，并在翻譯過程中起作用。
（3）過程③中目的基因導入棉花細胞后，可采用 PCRPCR技術從分子水平上檢測目的基因是否插入染色體；個體水平上的檢測為 觀察轉基因棉花的棉纖維是否變長觀察轉基因棉花的棉纖維是否變長。
（4）由圖分析可知，轉基因長絨棉棉纖維較普通棉棉纖維長的原因是 轉基因長絨棉細胞內的反義GhMnaA2基因轉錄的mRNA能與細胞內的GhMnaA2基因轉錄的mRNA互補配對，從而抑制該基因的表達，缺少3-甘露糖苷酶，半纖維素不被降解，從而使轉基因長絨棉的棉纖維長于普通棉花轉基因長絨棉細胞內的反義GhMnaA2基因轉錄的mRNA能與細胞內的GhMnaA2基因轉錄的mRNA互補配對，從而抑制該基因的表達，缺少3-甘露糖苷酶，半纖維素不被降解，從而使轉基因長絨棉的棉纖維長于普通棉花。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】限制酶NotI會破壞目的基因，且質粒上沒有NotI的切割位點；從棉花細胞中提取GhMnaA2的mRNA，逆轉錄獲得GhMnaA2的cDNA；抗生素；E6啟動子和GhMnaA2基因；PCR；觀察轉基因棉花的棉纖維是否變長；轉基因長絨棉細胞內的反義GhMnaA2基因轉錄的mRNA能與細胞內的GhMnaA2基因轉錄的mRNA互補配對，從而抑制該基因的表達，缺少3-甘露糖苷酶，半纖維素不被降解，從而使轉基因長絨棉的棉纖維長于普通棉花
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：21引用：2難度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7