噬菌體展示技術是將外源蛋白基因插入到噬菌體的適當置，使外源蛋白最終展示引子代噬菌體表面的技術。為臨床檢測腫瘤壞死因子（TNFα，由巨噬細胞分泌的一種蛋白質），利用“噬菌體展示技術”獲得TNFα抗體的部分過程如圖所示，其中a、b、c均為噬菌體。請分析并回答下列相關問題：（1）獲取TNFα抗體的基因時，可從康復者的漿細胞中提取總RNA，加入 逆轉錄逆轉錄酶獲得cDNA，利用抗體的VH和VL設計引物，以雙鏈cDNA為模板，PCR得到抗體可變區基因序列。擴增該段時，還需加入 TaqTaq酶，若要將具復制15次，則共需要引物 216-2216-2個。
（2）噬菌體結構包括DNA和衣殼蛋白。獲得的TNFα抗體基因需插入到噬菌體的 衣殼蛋白基因衣殼蛋白基因之后，使表達的抗體以融合蛋白的形式展示在噬菌體表面。
（3）篩選過程中，噬菌體與目標分子經一定時間孵育，圖中噬菌體 cc（填字母）即為成功轉入TNFα抗體基因的噬菌體。將其洗脫后侵染大腸桿菌增殖，可得到大量TNFα抗體。在其感染大腸桿菌時，不需要不需要（“需要”或“不需要”）制備大腸桿菌感受態細胞，原因是 因為該噬菌體可以侵染到大腸桿菌因為該噬菌體可以侵染到大腸桿菌。
（4）上述過程獲得的TNFα抗體與康復者體內的不完全相同，原因是大腸桿菌 是原核生物，不含內質網和高爾基體，不能對分泌蛋白進行加工是原核生物，不含內質網和高爾基體，不能對分泌蛋白進行加工。
（5）關于噬菌體展示技術的敘述，正確的是 ABCABC。
A．噬菌體簡單的結構組成將內部基因與表達在外部的蛋白質建立聯系
B．篩選的高效性和特異性，使挑選到高親和力的抗體成為可能
C．所挑選到的微量存在的噬菌體可通過感染大腸桿菌得到富集擴大
D．與單克隆抗體技術相比，其產量較低，無法大量制備
【考點】噬菌體侵染細菌實驗．
【答案】逆轉錄；Taq；216-2；衣殼蛋白基因；c；不需要；因為該噬菌體可以侵染到大腸桿菌；是原核生物，不含內質網和高爾基體，不能對分泌蛋白進行加工；ABC
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：17引用：1難度：0.7
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1．同位素標記法在DNA是主要遺傳物質的認知歷程和DNA的復制特點的探索方面都有所運用．回答下列問題：
（1）赫爾希和蔡斯的T2噬菌體侵染細菌實驗，不用14C和18O同位素標記的原因是，T2噬菌體不能侵染結核桿菌的原因是．
（2）若一個核DNA均為15N標記的果蠅（2n=18）精原細胞，增殖過程中消耗的原料均不含15N，則：
①該精原細胞通過有絲分裂進行增殖時，第一次有絲分裂產生的每個子細胞內有條染色體含有15N；第二次有絲分裂產生的每個子細胞內有條染色體含有15N．
②該精原細胞通過減數分裂產生配子時，配子中有條染色體含有15N．
③綜上分析，細胞增殖過程中著絲點第次斷裂時，即將產生的每個子細胞內所有染色體都含有15N．
（3）DNA是主要的遺傳物質，該處“主要”的含義是；染色體主要由DNA和蛋白質構成，該處“主要”說明．發布：2025/1/21 8:0:1組卷：14引用：1難度：0.5 -
2．如圖是著名的噬菌體侵染細菌的實驗和肺炎雙球菌轉化實驗的部分步驟：
（1）赫爾希和蔡斯采用的實驗方法是，該實驗能否用15N來標記，為什么？．
（2）若要大量制備32P標記的噬菌體，需先用含32P的培養基培養，再用噬菌體去感染它．T2噬菌體DNA復制的場所是．
（3）從圖中所示結果分析，該實驗標記的是（DNA還是蛋白質），當接種噬菌體后培養時間過長，會發現上清液中的放射性升高，最可能的原因是復制增殖后的噬菌體．
（4）如圖的“肺炎雙球菌轉化實驗”得出的結論是．加熱殺死的S型菌中的DNA仍有活性的原因可能是．發布：2025/1/3 8:0:1組卷：13引用：1難度：0.5 -
3．λ噬菌體的線性雙鏈DNA兩端各有一段單鏈序列，這種噬菌體在侵染大腸桿菌后DNA會自連環化，如圖。關于λ噬菌體的說法，不正確的是（ ）
發布：2025/1/15 8:0:2組卷：26引用：1難度：0.7