丙肝病毒（HCV）是一種RNA病毒，人們將得到的HCV的多個抗原基因首尾相連，連接在同一調控元件下，可構成融合基因。對HCV感染的診斷步驟是：首先進行抗HCV抗體檢測，若檢測結果呈陽性則還需要進行HCV核酸檢測。HCV融合抗原可用于制作第三代HCV抗體檢測試劑。請回答下列問題：
  （1）首先需要獲得融合基因。即通過相關的RNA合成cDNA然后拼接起來，這個過程主要需要

逆轉錄

逆轉錄

酶和DNA連接酶等。其次要利用PCR技術擴增融合基因。即先根據融合基因的核苷酸序列，設計并合成引物，若該融合基因的序列如圖2（虛線處省略了部分核苷酸序列），則PCR設計應選用的兩種引物（部分）序列應分別為：①5′-AACTAT-3′，②

5′-AGAGGC-3′（或 3′-CGGAGA-5′）

5′-AGAGGC-3′（或 3′-CGGAGA-5′）

。引物能與變性的融合基因單鏈結合，在

Taq 酶

Taq 酶

催化作用下延伸，如此循環多次。
（2）構建融合基因表達載體。如圖1所示，表達載體上除了標注的DNA片段外，在融合基因上游還必須擁有的DNA片段（箭頭所示）是

啟動子

啟動子

，其作用是

為RNA聚合酶的識別和結合的位點，驅動融合基因轉錄出mRNA

為RNA聚合酶的識別和結合的位點，驅動融合基因轉錄出mRNA

。
（3）用融合基因表達載體轉化大腸桿菌感受態細胞。用含硫酸卡那霉素的培養基篩選出能生長的菌落，從而得到能產生HCV融合抗原的工程菌，原非感受態受體大腸桿菌細胞內應

不含有

不含有

（填“含有”或“不含有”）硫酸卡那霉素抗性基因。
（4）某人體內HCV抗體檢測結果呈陽性，但進行HCV核酸檢測時結果呈陰性，最可能的原因是

其感染HCV后通過免疫反應已將HCV清除，但體內存在抗HCV抗體

其感染HCV后通過免疫反應已將HCV清除，但體內存在抗HCV抗體

。