浙江大學農學院喻景權教授課題組研究發現，一種植物激素--油菜素內酯能促進農藥在植物體內的降解和代謝。用油菜素內酯處理后，許多參與農藥降解的基因（如P450基因和紅霉素抗性基因）的表達和酶活性都得到提高，在這些基因“指導”下合成的蛋白酶能把農藥逐漸轉化為水溶性物質或低毒甚至無毒物質，有的則被直接排出體外。某課題進行了如圖的操作，請回答下列問題：
（1）獲得油菜素內酯合成酶基因的方法 從基因文庫中獲取、人工合成的目的基因、利用PCR技術擴增從基因文庫中獲取、人工合成的目的基因、利用PCR技術擴增（至少答出兩種）。步驟①用PCR技術擴增基因的前提是 要有一段已知目的基因的核苷酸序列要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據這一序列合成 引物引物；步驟②用到的酶有 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。
（2）圖中導入重組質粒的方法是 感受態細胞轉化法感受態細胞轉化法，在導入之前應用一定濃度的 氯化鈣溶液氯化鈣溶液處理受體細菌。
（3）導入重組質粒2以后，往往還需要進行檢測和篩選，在含有 目的基因的DNA片段上目的基因的DNA片段上用放射性同位素標記制成探針，檢測是否導入了重組基因，在培養基中加入 紅霉素紅霉素可將含有目的基因的細胞篩選出來。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】從基因文庫中獲取、人工合成的目的基因、利用PCR技術擴增；要有一段已知目的基因的核苷酸序列；引物；限制酶和DNA連接酶；感受態細胞轉化法；氯化鈣溶液；目的基因的DNA片段上；紅霉素
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：2引用：3難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6