某研究所以馬尾藻巖藻聚糖（SF）為研究對象，體外培養小鼠肉瘤細胞S180，做抗腫瘤活性實驗的研究。下列為部分實驗步驟與結果。
實驗步驟：
①將S180腫瘤細胞以RPMI1640為營養液，在5%CO2培養箱中培養。
②將上述培養過的S180腫瘤細胞經酶消化，按1×103～1×105個?mL-1接種到96孔培養板，適宜條件下培養24h、48h、72h、96h后，以MTT法（又稱比色法，一種檢測細胞存活和生長的方法）于波長490nm處測定OD值，結果如圖1。
③在適宜的培養條件和恰當的S180腫瘤細胞接種濃度下，研究不同濃度（0 mg?mL-1、0.1 mg?mL-1、0.5 mg?mL-1、1 mg?mL-1、2 mg?mL-1、4 mg?mL-1、8 mg?mL-1、10 mg?mL-1、15 mg?mL-1、20 mg?mL-1、25 mg?mL-1、30 mg?mL-1）的SF對S180腫瘤細胞增殖的抑制情況，96h后以MTT法于波長490nm處測定OD值，結果如圖2。
請回答下列問題：
（1）步驟①中以RPMI1640為培養液培養S180腫瘤細胞的原理是 細胞增殖細胞增殖。培養液中除細胞所需的營養物質之外，通常還添加一定量的 抗生素抗生素，以防培養過程中的污染。
（2）步驟②中“消化”所使用的酶是 胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶），為減少OD值測定的誤差，應注意 多測量，取平均值多測量，取平均值。
（3）已知在一定細胞數目范圍內，MTT法測得的OD值與活細胞數量呈正相關，由圖1可知步驟③中恰當的S180腫瘤細胞接種濃度為 5×1035×103個?mL-1。
（4）圖2實驗結果表明，在一定范圍內SF濃度與細胞增殖的抑制作用呈 正相關正相關（填“正相關”或“負相關”），當SF濃度達到 2525mg?mL-1時細胞增殖的抑制作用達到極限，繼續增加SF濃度對細胞增殖的抑制作用變化不明顯。
【考點】動物細胞培養的條件與過程；細胞的癌變的原因及特征．
【答案】細胞增殖；抗生素；胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）；多測量，取平均值；5×103；正相關；25
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：23引用：1難度：0.6
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1．動物細胞培養和植物組織培養是細胞工程的基本技術，下列關于這兩項技術的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 1:30:1組卷：29引用：2難度：0.7 -
2．回答與基因工程、動物克隆和胚胎工程有關的問題：
（1）幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。在進行基因工程操作時，可以從植物體中提取幾丁質酶的mRNA，以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是。若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。
（2）為了提高動物成纖維細胞克隆形成率，可以選擇適宜的培養基、添加牛血清、以支持生長等措施。當第一個卡氏瓶中的細胞濃度不再增加時，若要細胞繼續增殖，可采用的方法是。細胞培養過程中，培養箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是。
（3）下列關于胚胎工程的敘述，錯誤的是
A．在動物的飼料中添加一定量的促性腺激素促使超數排卵
B．若在囊胚期進行胚胎分割，內細胞團均等分割，滋養成則不必
C．可以從雌性動物體內卵泡處吸取卵泡液，取出卵母細胞進一步培養成熟
D．胚胎成纖維細胞可以用于胚胎干細胞的培養，因為其能分泌抑制細胞分化的物質。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：4引用：1難度：0.7 -
3．據國際糖尿病聯盟最新數據，2021年全球約5.37億成人患有糖尿病，670萬成人因糖尿病或其并發癥死亡。如圖是研究人員提出的治療方案，請回答下列問題：
（1）從患者體內獲得體細胞后，對其進行的初次培養稱為，培養的細胞在貼壁生長至鋪滿培養皿底時停止分裂，這種現象稱為。一般來說，動物細胞培養需要的條件有（少答出兩點）。
（2）利用PCR技術擴增正常胰島素基因的前提條件是。目前臨床用的胰島素生效較慢，科學家將胰島素β鏈的第28和29個氨基酸調換順序，成功獲得了速效胰島素。生產速效胰島素，需要對進行定向改造。
A.胰島素
B.胰島素mRNA
C.胰島素基因
D.胰島
（3）欲檢測胰島類似細胞是否具有胰島B細胞的正常生理功能，可設計如下實驗：將等量的胰島類似細胞與正常胰島B細胞分別加入兩組相等濃度的培養液中，適宜且相同條件下進行培養，一段時間后分別檢測兩組培養液中。
（4）該治療糖尿病的方法與異體移植相比，突出的優點是。發布：2024/12/31 2:30:2組卷：35引用：2難度：0.6