宮頸癌是女性疾病中常見的癌癥,具有很高的發病率和死亡率。研究發現,長期高危型人乳頭瘤病毒(HPV)感染是該病的主要病因。HPV是具有雙鏈環狀DNA分子的球狀病毒,L1蛋白是其外殼蛋白的主要結構蛋白。臨床上,抗HPV-L1蛋白單克隆抗體的制備對該病的防治和檢測具有重要意義。根據所學知識,回答下列問題:
(1)在制備L1蛋白單克隆抗體時,首先將HPV-L1蛋白注入小鼠體內,該操作的目的是 使小鼠體內產生Ll蛋白免疫過的B淋巴細胞使小鼠體內產生Ll蛋白免疫過的B淋巴細胞。
(2)科研人員從上述注射過的小鼠體內分離出脾臟,無菌環境下利用 胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)將其分散成單個細胞,然后在特定的 選擇培養基選擇培養基上加入 聚乙二醇或滅活的病毒聚乙二醇或滅活的病毒促使脾細胞與骨髓瘤細胞融合,在該培養基上 未融合的親本細胞或融合的具有同種類型的細胞未融合的親本細胞或融合的具有同種類型的細胞都會死亡,只有融合的雜交瘤細胞才能生長。
(3)將上述獲得的雜交瘤細胞進行 克隆化培養和抗體檢測克隆化培養和抗體檢測,經多次篩選,就可獲得足夠數量的具有 既能無限增殖,又能分泌抗L1蛋白抗體既能無限增殖,又能分泌抗L1蛋白抗體的雜交瘤細胞。
(4)噬菌體展示技術是一種將外源多肽或蛋白質的基因與噬菌體的外殼蛋白結構基因相結合,從而使外源多肽或蛋白展示在噬菌體表面的技術。該技術可以幫助免疫學家確定某種蛋白質的抗原表位(抗原分子中決定抗原特異性的特殊化學基團)。科研人員利用噬菌體展示技術確定HPV-L1蛋白的抗原表位時,需將L1蛋白基因插入到噬菌體外殼蛋白結構基因的適當位置,該過程需要 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶(填酶的名稱)。HPV-L1蛋白可以展示在噬菌體表面的理論基礎是 地球上的生物共用一套遺傳密碼地球上的生物共用一套遺傳密碼。
【考點】單克隆抗體及其應用.
【答案】使小鼠體內產生Ll蛋白免疫過的B淋巴細胞;胰蛋白酶(或膠原蛋白酶);選擇培養基;聚乙二醇或滅活的病毒;未融合的親本細胞或融合的具有同種類型的細胞;克隆化培養和抗體檢測;既能無限增殖,又能分泌抗L1蛋白抗體;限制酶和DNA連接酶;地球上的生物共用一套遺傳密碼
【解答】
【點評】
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發布:2024/8/9 8:0:9組卷:16引用:3難度:0.7
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