如圖為“乙肝基因工程疫苗”生產和使用過程圖解，質粒上箭頭所指部位為相應的限制性內切核酸酶的切割位點。質粒中 lacZ 基因可使細菌利用加入培養基的物質X-gal,使菌落顯現出藍色；若無該基因，菌落則成白色。請回答下列問題：
（1）構建基因表達載體時，雙酶切與單酶切相比，其好處有防止 目的基因自身環化目的基因自身環化和防止 目的基因反向接入質粒目的基因反向接入質粒。
根據圖示，該過程中獲取目的基因最好使用的限制性內切核酸酶是 BamHⅠ和EcoRⅠBamHⅠ和EcoRⅠ。
（2）過程①需要的酶是 DNA連接酶DNA連接酶，過程②需要先將大腸桿菌用 Ca2+Ca2+處理，目的是 使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環境中DNA分子的生理狀態使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環境中DNA分子的生理狀態。
（3）篩選轉基因成功的大腸桿菌，需要在培養基中加入 青霉素青霉素和 X-galX-gal，如果出現 白色白色菌落，說明基因表達載體成功轉入大腸桿菌。
（4）③過程需要經過 轉錄轉錄和 翻譯翻譯過程，其中在大腸桿菌核糖體上完成的過程是 翻譯翻譯。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】目的基因自身環化；目的基因反向接入質粒；BamHⅠ和EcoRⅠ；DNA連接酶；Ca2+；使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環境中DNA分子的生理狀態；青霉素；X-gal；白色；轉錄；翻譯；翻譯
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：7引用：1難度：0.7
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6