科研人員構建了可表達H-M3融合蛋白的重組質粒并進行了檢測，該質粒的部分結構如圖所示，其中M3編碼序列表達標簽短肽M3。
（1）圖中啟動子的作用是 RNA聚合酶識別和結合的部位，驅動基因轉錄RNA聚合酶識別和結合的部位，驅動基因轉錄。除圖中標出的結構外，作為載體，質粒還需具備的結構有 限制酶切割位點、標記基因、復制原點等限制酶切割位點、標記基因、復制原點等（答出兩點即可）。構建重組質粒需要使用T4DNA連接酶，下列屬于T4DNA連接酶底物的是 ②④②④。
（2）構建重組質粒后，為了確定H基因連接到質粒中且插入方向正確，需進行PCR檢測，若僅用一對引物，應選擇圖中的 F1和R2F1和R2，添加引物的原因是 DNA聚合酶不能從頭合成DNA，只能從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸DNA聚合酶不能從頭合成DNA，只能從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸。
（3）若H基因為水母體內的綠色熒光蛋白基因，科研人員將構建的表達載體導入大腸，結果發現大腸桿菌有的發綠色熒光，有的發黃色熒光，有的不發熒光。將發黃色熒光的大腸桿菌分離純化后，對H基因進行測序，發現其堿基序列發生改變，將該基因命名為H1基因（黃色熒光蛋白基因）。若要通過基因工程的方法探究H1基因能否在真核細胞中表達，實驗思路是 將構建的含HI基因的表達載體導入酵母菌中，檢測酵母菌是否能發黃色熒光將構建的含HI基因的表達載體導入酵母菌中，檢測酵母菌是否能發黃色熒光。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】RNA聚合酶識別和結合的部位，驅動基因轉錄；限制酶切割位點、標記基因、復制原點等；②④；F1和R2；DNA聚合酶不能從頭合成DNA，只能從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸；將構建的含HI基因的表達載體導入酵母菌中，檢測酵母菌是否能發黃色熒光
【解答】
【點評】
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發布：2024/7/15 8:0:9組卷：6引用：2難度：0.6
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