干擾素是動物和人體細胞受到病毒感染后產生的一種糖蛋白，具有抗病毒、抑制細胞增殖及抗腫瘤作用。利用基因工程技術培育能生產干擾素的植物細胞流程如圖所示。請回答下列問題：
| 限制酶 | 識別序列和切割位點 |
| EcoRⅠ | G?ATTC |
| BanHⅠ | G?ATCC |
| SmaⅠ | CCC?GG |
| ApaⅠ | CCGCC?C |
（1）分析如圖，可選擇限制酶
BamHⅠ、EcoRⅠ
BamHⅠ、EcoRⅠ
來切割質粒，其目的是 確保目的基因與質粒正確連接
確保目的基因與質粒正確連接
。質粒被切割后，可用 DNA連接
DNA連接
酶將其與目的基因連接。（2）圖中的重組質粒，除目的基因、標記基因外，還必須有
啟動子、終止子、復制原點等
啟動子、終止子、復制原點等
。（3）誘導產生胡蘿卜愈仿組織的過程稱為
脫分化
脫分化
。③過程所使用的固體培養基，除了無機鹽有機營養物質瓊脂、植物激素外，還需添加卡那霉素。卡那霉素的作用是 篩選出導入重組質粒的植物細胞
篩選出導入重組質粒的植物細胞
。在分子水平上通常采用 DNA分子雜交
DNA分子雜交
技術檢測干擾素基因是否導入受體細胞。培養產生干擾素的胡蘿卜細胞的技術是 植物組織培養
植物組織培養
。（4）干擾素在體外保存相當困難，但如果將其分子中個別氨基酸進行替換，可延長其在體外的保存期。改造思路是從預期
蛋白質功能
蛋白質功能
出發，其直接操作對象是 基因
基因
，此項技術屬于 蛋白質
蛋白質
（選填“基因”“蛋白質”）工程。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】BamHⅠ、EcoRⅠ；確保目的基因與質粒正確連接；DNA連接；啟動子、終止子、復制原點等；脫分化；篩選出導入重組質粒的植物細胞；DNA分子雜交；植物組織培養；蛋白質功能；基因；蛋白質
【解答】
【點評】
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發布：2024/7/17 8:0:9組卷：0引用：1難度：0.5
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發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
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（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6