干燥綜合征（SS）是臨床常見的一種自身免疫病，其血清中存在多種抗體，其中以SSB抗體異性最強，影響最顯著。科研人員為建立抗SSB抗體全自動定量檢測的磁微粒化學發光試劑，利用基因工程技術獲得重組SSB蛋白，流程如圖，請分析回答：
（1）利用RNA通過①過程獲得cDNA需要 逆轉錄逆轉錄酶。通過PCR技術擴增SSB基因的前提是要測定該基因兩端部分核苷酸序列，目的是 便于合成引物便于合成引物。
（2）為確保與PET41a質粒定向連接，獲得的SSB基因兩端要含有 BamHI和XhoⅠBamHI和XhoⅠ酶切位點。在PCR過程中，第 三三輪循環產物中出現含所需限制酶的片段A。
（3）獲得含SSB基因的重組質粒后，進行如下實驗切割原質粒和重組質粒，獲得片段大小如下表（1kb=1000堿基對）（注意：DNA片段大小與圖中所畫比例一致）。SSB基因的長度為 3kb3kb。
| 限制酶 | EcoRⅠ | BamHⅠ和XhoⅠ |
| 原質粒 | 8.1kb | 2.7kb、5.4kb |
| 重組質粒 | 3.4kb、5.0kb | 未做該處理 |
卡那霉素
卡那霉素
的培養基上，收集菌落進行鑒定，將陽性菌落進一步純化后將菌體破碎處理，篩選得到重組SSB蛋白。（5）為檢測重組質粒表達情況及重組蛋白與抗體結合能力，科研人員通過注射含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑進行如下實驗，請完成下表：
| 實驗步驟 | 實驗操作 |
| 分組 | 取健康、生理狀態相同的小鼠隨機均分成兩組。 |
| 實驗處理 | 實驗組注射含純化的重組SSB蛋白的弗氏佐劑，對照組① 注射等量不含重組SSB蛋白的弗氏佐劑 注射等量不含重組SSB蛋白的弗氏佐劑 ，連續三次。 |
| 飼養 | 在相同且適宜環境中飼養。 |
| ② 檢測（獲取實驗結果） 檢測（獲取實驗結果） |
第三次免疫后第七天取小鼠血清并提取抗體進行檢測。 |
| 結果分析 | 與對照組相比，若抗體檢測呈③ 陽性 陽性 ，則表明重組SSB蛋白具有與相應抗體高度結合的能力。 |
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉錄；便于合成引物；BamHI和XhoⅠ；三；3kb；卡那霉素；注射等量不含重組SSB蛋白的弗氏佐劑；檢測（獲取實驗結果）；陽性
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：25引用：1難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6