我國有

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的成年人因乳糖酶（LCT）分泌少，不能完全消化牛奶中的乳糖，食用牛奶后會出現(xiàn)腹瀉等不適癥狀。為解決這一乳糖不耐受問題，我國科學(xué)家利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)和克隆技術(shù)將腸乳糖酶基因?qū)肽膛；蚪M，培育出了可產(chǎn)低乳糖牛奶的拉克斯牛，培育過程如圖所示，A～C表示操作步驟。回答下列問題：
（圖中胚胎成纖維細(xì)胞是由胚胎干細(xì)胞經(jīng)分裂分化后產(chǎn)生的一類仍具有分裂能力的細(xì)胞）

（1）科學(xué)家常用PCR技術(shù)特異性地快速擴(kuò)增腸乳糖酶基因，若將1個(gè)含腸乳糖酶基因的DNA分子經(jīng)PCR反應(yīng)循環(huán)3次后，共需要消耗引物

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個(gè)。PCR產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定，在凝膠中DNA分子的遷移速率與

DNA分子的大小、構(gòu)象（或形狀）、所帶電荷、凝膠濃度等

DNA分子的大小、構(gòu)象（或形狀）、所帶電荷、凝膠濃度等

（答出兩點(diǎn)）有關(guān)。通過步驟A獲取重組質(zhì)粒T時(shí)，除需要限制酶BamHⅠ外，還需要

限制酶HindⅢ、DNA連接酶

限制酶HindⅢ、DNA連接酶

等酶的參與。
（2）重組質(zhì)粒T中，除腸乳糖酶基因、標(biāo)記基因、終止子、復(fù)制原點(diǎn)外，還必須有

乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子

乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子

（填“乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子”或“腸乳糖酶基因的啟動(dòng)子”）；選擇該啟動(dòng)子的原因是

使腸乳糖酶基因在乳腺細(xì)胞中能特異性表達(dá)

使腸乳糖酶基因在乳腺細(xì)胞中能特異性表達(dá)

。實(shí)現(xiàn)步驟B常用的方法是

顯微注射法

顯微注射法

，步驟C涉及的技術(shù)稱為

細(xì)胞核移植技術(shù)

細(xì)胞核移植技術(shù)

。
（3）動(dòng)物基因工程中常用受精卵作為受體細(xì)胞，而在拉克斯牛的培育過程中選擇胚胎成纖維細(xì)胞作為受體細(xì)胞，此舉有何意義：

胚胎成纖維細(xì)胞能夠分裂增殖，而基因工程成功率較低，便于為基因工程提供大量受體細(xì)胞，有利于篩選

胚胎成纖維細(xì)胞能夠分裂增殖，而基因工程成功率較低，便于為基因工程提供大量受體細(xì)胞，有利于篩選

。
（4）下列對拉克斯牛的分析中哪幾項(xiàng)是正確的？

AC

AC

。
A.拉克斯牛體內(nèi)的神經(jīng)、肌肉和乳腺細(xì)胞中均含有乳糖酶基因
B．除乳糖酶基因外，拉克斯牛的核基因與圖中黑白花奶牛相同
C.對圖中拉克斯牛進(jìn)行克隆繁育，無法獲得雄拉克斯牛
D.導(dǎo)入了乳糖酶基因的重組細(xì)胞2，一定能培育出拉克斯牛
（5）在牛胚胎移植前，可用分割針從囊胚的

滋養(yǎng)層

滋養(yǎng)層

細(xì)胞取樣進(jìn)行性別鑒定，將檢驗(yàn)合格的胚胎移植到經(jīng)

同期發(fā)情

同期發(fā)情

處理的受體母牛子宮內(nèi)，經(jīng)發(fā)育、妊娠得到克隆牛。若現(xiàn)已確定LCT基因插入到了牛染色體上，卻未獲得較低乳糖含量的乳汁，為進(jìn)一步確定原因，可采用

核酸分子雜交（或抗原一抗體雜交）

核酸分子雜交（或抗原一抗體雜交）

技術(shù)進(jìn)行檢測。