Sanger法DNA測序的核心原理：由于雙脫氧核苷酸（ddNTP）五碳糖的2'和3'碳原子都不含羥基，在DNA合成過程中不能形成“相應(yīng)化學(xué)鍵”，因此可中斷DNA分子合成反應(yīng)。在四個含有4種脫氧核苷酸（dNTP）的PCR反應(yīng)體系中分別加入一定比例帶有放射性同位素標記的ddNTP（分別為ddATP、ddCTP、ddGTP和ddTTP），在PCR過程中復(fù)制隨機終止，產(chǎn)生四組不同長度的一系列終止處帶有標記的DNA片段，如圖1．然后在變性凝膠上進行電泳和放射自顯影后，可以根據(jù)電泳帶的位置確定待測分子的DNA序列，具體過程見圖2．（注：ddA是ddATP的縮寫形式）
（1）題干中“相應(yīng)化學(xué)鍵”是磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵，圖1過程Ⅰ橫線①處加入的物質(zhì)的特點是耐高溫耐高溫，該過程需要添加引物的原因是DNA聚合酶只能將游離的脫氧核苷酸添加到已有核酸片段上DNA聚合酶只能將游離的脫氧核苷酸添加到已有核酸片段上。
（2）題干中“在變性凝膠上進行電泳……”中“變性”是指破壞DNA分子中氫鍵，獲得單鏈破壞DNA分子中氫鍵，獲得單鏈，其目的是避免模板鏈對結(jié)果的影響（或使模板鏈與子鏈分離，使電泳結(jié)果直接反映子鏈的長度，便于讀序）避免模板鏈對結(jié)果的影響（或使模板鏈與子鏈分離，使電泳結(jié)果直接反映子鏈的長度，便于讀序）。
（3）某同學(xué)要通過PCR技術(shù)獲得被32P標記且以堿基“C”為末端、不同長度的子鏈DNA片段，在反應(yīng)管中已有模板、引物、酶和相應(yīng)緩沖液等，還需加入的原料有dATP、dGTP、dTTP、dCTP、ddCTPdATP、dGTP、dTTP、dCTP、ddCTP。
（4）若模板鏈是“3'…TCAGCTCGAATC…5'”，變性后電泳結(jié)果如圖2所示，則模板DNA電泳后所處的位置最可能為b處b處（選填“a處”或“b處”），原因是模板DNA長度最長（分子量最大）模板DNA長度最長（分子量最大）。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定；目的基因的篩選與獲取．
【答案】磷酸二酯鍵；耐高溫；DNA聚合酶只能將游離的脫氧核苷酸添加到已有核酸片段上；破壞DNA分子中氫鍵，獲得單鏈；避免模板鏈對結(jié)果的影響（或使模板鏈與子鏈分離，使電泳結(jié)果直接反映子鏈的長度，便于讀序）；dATP、dGTP、dTTP、dCTP、ddCTP；b處；模板DNA長度最長（分子量最大）
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：24引用：1難度：0.7
相似題
-
1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）。可利用定點突變的DNA構(gòu)建基因表達載體，常用將基因表達載體導(dǎo)入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內(nèi)，并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為。科研人員通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募毎酥校?jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細胞內(nèi)是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
相關(guān)試卷