M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達。現設計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養和胚胎移植等技術獲得M基因失活的轉基因克隆動物A，流程如圖所示。分析回答：

（1）過程①當在無菌無毒的環境中培養細胞至出現

接觸抑制

接觸抑制

現象時，需要對其進行分瓶處理。為保證環境無毒，應采取的措施是

對培養液和所有的培養用具進行無菌處理，通常在培養液中添加一定量的抗生素，定期更換培養液，以便清除代謝產物

對培養液和所有的培養用具進行無菌處理，通常在培養液中添加一定量的抗生素，定期更換培養液，以便清除代謝產物

。
（2）過程②為顯微操作去核過程，去除的“核”其實是

細胞核和第一極體

細胞核和第一極體

結構；與原生質體融合相比，過程③特有的誘導融合方法是

用滅活的病毒誘導

用滅活的病毒誘導

。
（3）為獲得更多的克隆動物A.可在過程⑤胚胎移植前對胚胎進行分割，分割囊胚時，要注意

均等分割內細胞團

均等分割內細胞團

。
（4）鑒定轉基因動物：以免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合，篩選融合雜種細胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的實驗思路：

用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出雜交瘤細胞，利用抗原—抗體雜交技術，檢測篩選出的雜交瘤細胞能否產生M蛋白的單克隆抗體。如果不能產生，說明M基因在克隆動物A中已失活，如果能產生，說明M基因在克隆動物A中沒有失活

用特定抗原刺激小鼠，然后取出已免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出雜交瘤細胞，利用抗原—抗體雜交技術，檢測篩選出的雜交瘤細胞能否產生M蛋白的單克隆抗體。如果不能產生，說明M基因在克隆動物A中已失活，如果能產生，說明M基因在克隆動物A中沒有失活

。