進行乙肝疫苗的注射，可以有效地預防乙肝的發病。如圖為“乙肝基因工程疫苗”的生產和使用過程圖解，質粒上箭頭所指部位為相應的限制酶的切割位點。質粒中lacZ基因可使細菌利用加入培養基的物質X-gal,使菌落顯現出藍色；若無該基因，菌落則顯現出白色。請回答下列問題：
（1）在基因工程中使用的基本工具除載體外，還有 限制限制酶和 DNA連接DNA連接酶。
（2）為了制備乙肝疫苗，可以通過基因工程技術生產。基因工程的基本操作流程是 目的基因的獲取→基因表達載體的構建→將目的基因導入受體細胞→目的基因以及目的基因表達的檢測鑒定。目的基因的獲取→基因表達載體的構建→將目的基因導入受體細胞→目的基因以及目的基因表達的檢測鑒定。（用文字和箭頭表示）。
（3）據圖分析構建基因表達載體時，切割含有目的基因的DNA片段不宜使用EcoRⅤ酶，原因是 用EcoRⅤ酶切割會破壞青霉素抗性基因，影響篩選用EcoRⅤ酶切割會破壞青霉素抗性基因，影響篩選。
（4）篩選轉基因成功的大腸桿菌，需要在培養液中加入 青霉素青霉素和 X-galX-gal；如果出現白菌落，說明基因表達載體成功轉入大腸桿菌，解釋重組質粒中lacZ基因不存在的原因是 構建基因表達載體時應該選用限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ進行切割，這樣會破壞lacZ基因構建基因表達載體時應該選用限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ進行切割，這樣會破壞lacZ基因。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】限制；DNA連接；目的基因的獲取→基因表達載體的構建→將目的基因導入受體細胞→目的基因以及目的基因表達的檢測鑒定。；用EcoRⅤ酶切割會破壞青霉素抗性基因，影響篩選；青霉素；X-gal；構建基因表達載體時應該選用限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ進行切割，這樣會破壞lacZ基因
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：1引用：1難度：0.7
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