人乳鐵蛋白是乳汁中一種重要的非血紅素鐵結(jié)合糖蛋白。乳鐵蛋白不僅參與鐵的轉(zhuǎn)運，而且具有廣譜抗菌抗氧化、抗癌、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)等強(qiáng)大生物功能。如圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的過程。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點。據(jù)圖回答：
（1）若用PCR技術(shù)擴(kuò)增人乳鐵蛋白基因，其前提條件是有一段人乳鐵蛋白基因（目的基因）的核苷酸序列人乳鐵蛋白基因（目的基因）的核苷酸序列，以便合成相應(yīng)的引物，合成的引物能與待擴(kuò)增區(qū)段兩端兩端（中間/兩端/左端/右端）的DNA序列彼此互補(bǔ)。
（2）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用HindⅢ和BamHIHindⅢ和BamHI限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行。經(jīng)過兩種培養(yǎng)基培養(yǎng)后再從DD處（填字母），挑出大腸桿菌擴(kuò)增帶有外源DNA的重組載體。為使人乳鐵蛋白基因在牛的乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)，應(yīng)在基因的上游插入牛乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件牛乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件。
（3）過程②的代孕牛需要進(jìn)行同期發(fā)情同期發(fā)情處理。若需獲得多頭轉(zhuǎn)基因牛可對早期胚胎進(jìn)行分割，對囊胚進(jìn)行分割時需要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。
（4）為檢測轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中是否含有人乳鐵蛋白，可采用抗原抗體雜交抗原抗體雜交技術(shù)。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】人乳鐵蛋白基因（目的基因）的核苷酸序列；兩端；HindⅢ和BamHI；氨芐青霉素；D；牛乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件；同期發(fā)情；將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割；抗原抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：17引用：2難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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