某種質粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點，它們的識別序列和黏性末端各不相同，該質粒同時含有抗四環素基因和抗氨芐青霉素基因。科學家利用此質粒培育轉基因抗鹽作物，提高糧食種植面積取得重大進展。其培育過程如甲圖，請回答下列問題。
（1）在構建重組質粒時，應選用SalⅠ、HindⅢSalⅠ、HindⅢ兩種酶對質粒和含抗鹽基因的DNA進行切割，以保證重組質粒序列的唯一性。
（2）基因工程中的檢測篩選是一個重要的步驟。為篩選出導入了重組質粒的農桿菌，乙圖表示運用影印培養法（使一系列培養皿的相同位置上能出現相同菌落的一種接種培養方法）檢測重組質粒是否導入了土壤農桿菌。
培養基除了含有土壤農桿菌生長繁殖必需的成分和瓊脂外，培養基A和培養基B分別還要含有氨芐青霉素氨芐青霉素、四環素（氨芐青霉素和四環素）四環素（氨芐青霉素和四環素）。從檢測篩選的結果分析，含有目的基因的是4和64和6（填數字）菌落中的細菌。
（3）為了確定抗鹽作物是否培育成功，要用放射性同位素放射性同位素標記的含抗鹽基因的DNA片段作探針進行分子雜交檢測，還要從個體水平用一定濃度的鹽水澆灌煙草植株（將作物移栽到鹽堿地中種植）一定濃度的鹽水澆灌煙草植株（將作物移栽到鹽堿地中種植）（方法）鑒定作物的耐鹽性。
（4）將轉入抗鹽基因的工程細胞培育成完整植株需要用組織培養技術，組織培養技術依據的原理是細胞的全能性細胞的全能性。
（5）將抗鹽基因導入作物細胞內，使作物具有了抗鹽性狀，這種變異類型屬于基因重組基因重組。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】SalⅠ、HindⅢ；氨芐青霉素；四環素（氨芐青霉素和四環素）；4和6；放射性同位素；一定濃度的鹽水澆灌煙草植株（將作物移栽到鹽堿地中種植）；細胞的全能性；基因重組
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：21引用：1難度：0.7
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
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（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6