植物不能代謝亞磷酸鹽(Phi),但導入并表達ptxD基因的轉基因植物可將Phi轉化為供作物生長發育所需的Pi,以獲得更高產量。當施用Phi時,雜草不能與ptrD轉基因農作物競爭可利用的磷,因此,ptxD轉基因植株相比于雜草有明顯的競爭優勢。Phi不能被藻類代謝且對藻類沒有毒性,施用后不會促進赤潮的發生,對水生生態系統生物多樣性不構成威脅。油菜是我國重要的油料作物,油菜田間常伴生大量雜草,嚴重影響了油菜產量,除草劑長期過量使用,導致全球抗除草劑雜草數量逐年增加。為控制雜草和解決除草劑過量使用帶來的問題,某研究團隊將ptxD基因轉入野生型油菜“Westar”(WT)中,獲得轉基因油菜。

(1)為獲得大量的ptxD基因,過程b中需先加熱至90-95℃然后冷卻至55~60℃,冷卻的目的是 使引物結合到互補DNA鏈上使引物結合到互補DNA鏈上。過程b循環完成后,通常會繼續72℃延伸5-10分鐘,其目的是 使子鏈延伸完全使子鏈延伸完全。
(2)為獲得轉基因植物,本實驗采用 農桿菌轉化農桿菌轉化法侵染油菜幼苗的下胚軸,主要過程如下:
①過程d:將重組質粒導入農桿菌,得到含重組質粒的農桿菌菌液。
②將無菌培養的野生型油菜幼苗的下胚軸受體進行農桿菌侵染,侵染結束后進行一段時間的共培養,共培養的目的是 使農桿菌Ti質粒的T-DNA轉移至受體細胞并整合到其染色體上使農桿菌Ti質粒的T-DNA轉移至受體細胞并整合到其染色體上。
③過程f:共培養結束后轉移至相應培養基上誘導愈傷。
④過程g:誘導分化、生根。
(3)本研究利用植物表達載體上的潮霉素抗性基因和 ptxDptxD基因作為篩選標記。可用潮霉素或 PhiPhi作為篩選劑。
(4)若在試管苗期間通過分子水平的檢測,檢驗轉基因油菜的ptxD基因是否表達,應檢測 是否轉錄產生相應的mRNA、是否翻譯產生相關的蛋白質是否轉錄產生相應的mRNA、是否翻譯產生相關的蛋白質(答兩點)
【答案】使引物結合到互補DNA鏈上;使子鏈延伸完全;農桿菌轉化;使農桿菌Ti質粒的T-DNA轉移至受體細胞并整合到其染色體上;ptxD;Phi;是否轉錄產生相應的mRNA、是否翻譯產生相關的蛋白質
【解答】
【點評】
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發布:2024/6/27 10:35:59組卷:21引用:2難度:0.6
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