TAS2R38是一種苦味受體蛋白,主要表達于味蕾上的味覺受體細胞,介導苦味的感知,它可以幫助人類識別多種天然和合成的苦味化合物,如苯硫脲(PTC)。TAS2R38基因位于人類第7號染色體上,長度為1143bp。有顯性基因T和隱性基因t。基因型為TT、Tt、tt的個體對PTC的嘗味能力分別表現為非常敏感、敏感和不敏感。某興趣小組設計特異性引物擴增了7個學生(編號1~7)TAS2R38基因的部分片段(221bp),其中T基因包含GGCCAC序列,t基因包含GGGCAC序列,通過限制酶HaeⅢ(識別序列為GGCC,在G與C之間切割)酶切基因片段,利用瓊脂糖凝膠電泳鑒定酶切產物,從而確定學生的基因型。相關實驗過程及結果如圖所示,請回答下列問題:

(1)PCR反應過程包括變性、復性(退火)、延伸復性(退火)、延伸三步,變性的目的是 使DNA雙鏈受熱變性后解為單鏈使DNA雙鏈受熱變性后解為單鏈。
(2)PCR擴增目的基因片段時需設計2種引物,引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。此外PCR反應體系中還需加入的物質有 DNA模板、4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶DNA模板、4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶(答出一點即可)。
(3)若圖中PCR擴增連續循環6次,需要消耗引物2 6363個,不含引物1的DNA片段占全部DNA片段的比例為 164164。
(4)限制酶HaeⅢ切割基因片段后產生的末端是 平末端平末端。T基因擴增得到的DNA片段被HaeⅢ酶切后得到的片段長度是 176bp和45bp176bp和45bp。
(5)根據電泳鑒定結果可知,這7個學生中對PTC的嘗味能力不敏感的是 6號6號。
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【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】復性(退火)、延伸;使DNA雙鏈受熱變性后解為單鏈;使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸;DNA模板、4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶;63;;平末端;176bp和45bp;6號
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【解答】
【點評】
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發布:2024/7/7 8:0:9組卷:10引用:2難度:0.6
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