有研究表明CDKN2B基因與小鼠的壽命有關，科學家將該基因導入小鼠體內，統計其壽命是否高于正常小鼠。圖1表示CDKN2B基因與相關限制酶酶切位點，該基因轉錄出的mRNA堿基序列與A鏈的堿基序列相同（T、U視為相同的堿基），圖2為質粒簡圖，請回答下列有關問題：
（1）科學家首先采用PCR技術對目的基因進行擴增。PCR-過程中有兩次升溫一次降溫，其中降溫的目的是讓兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合讓兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合。
（2）科學家在構建基因表達載體過程時，目的基因應插在啟動子啟動子和終止子終止子之間才能正常表達。單獨使用限制酶HindⅢ分別切割目的基因和載體后產生黏性末端。攜帶CDKN2B基因的重組質粒成功導入細胞后，發現約一半的細胞中沒有檢測到CDKN2B蛋白，原因是部分基因反向連接部分基因反向連接。為了避免這種現象的發生，應對以上方法進行改進，改進措施為同時用PstⅠ，EcoRI分別對目的基因和載體進行酶切同時用PstⅠ，EcoRI分別對目的基因和載體進行酶切。
（3）若想讓一個轉入了自的基因的受精卵發育成多個個體，可以采用胚胎分割胚胎分割技術，操作時應注意做到將囊胚的內細胞團均等分割將囊胚的內細胞團均等分割。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】讓兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合；啟動子；終止子；部分基因反向連接；同時用PstⅠ，EcoRI分別對目的基因和載體進行酶切；胚胎分割；將囊胚的內細胞團均等分割
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：8引用：1難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
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2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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