如圖表示某種綠色熒光蛋白基因表達載體的構建過程，綠色熒光蛋白基因有720個堿基對（bp），質粒有5369個堿基對（bp）。請據圖回答問題：
（1）質粒中“氨芐青霉素抗性基因”的作用是 便于篩選目的基因是否導入受體細胞便于篩選目的基因是否導入受體細胞。研究發現復制原點處的A和T特別多，有利于DNA復制時 解旋解旋過程的發生。
（2）限制酶 BamHⅠ的識別序列和切割位點是 G↓GATCC，該酶切形成的黏性末端是 —CTAG—CTAG。過程③所需的工具酶是 DNA連接酶DNA連接酶。
（3）已知圖中質粒經 BamHⅠ、HindⅢ雙酶切后進行電泳，出現了一條長度為5300bp的DNA條帶，則重組質粒的長度為 6020bp6020bp的DNA片段條帶。
（4）過程①用兩種限制酶切割質粒，與單一酶切相比，其優勢有 可以避免目的基因自身環化；可使目的基因定向插入到運載體中可以避免目的基因自身環化；可使目的基因定向插入到運載體中。過程②通過 PCR技術實現，進行 PCR時，需要在兩種引物的 5'5'端分別添加 BamHⅠ和 HindⅢ的識別序列。
（5）將重組質粒導入大腸桿菌前，要用 CaCl2處理大腸桿菌，其目的是 使大腸桿菌處于感受態（或處于容易吸收DNA的狀態）使大腸桿菌處于感受態（或處于容易吸收DNA的狀態）；進行篩選時，大腸桿菌培養基中除需要加入水、無機鹽、C源、N源、瓊脂等物質外，還要分別添加 四環素、氨芐青霉素四環素、氨芐青霉素。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】便于篩選目的基因是否導入受體細胞；解旋；—CTAG；DNA連接酶；6020bp；可以避免目的基因自身環化；可使目的基因定向插入到運載體中；5'；使大腸桿菌處于感受態（或處于容易吸收DNA的狀態）；四環素、氨芐青霉素
【解答】
【點評】
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發布：2024/4/20 14:35:0組卷：18引用：1難度：0.6
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（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6