奶酪是一種常見的食品，傳統的方法是從未斷奶的小牛的胃黏膜里提取牛凝乳酶，它能水解多肽鏈中苯丙氨酸和甲硫氨酸之間的肽鍵以促使牛奶凝結來生產奶酪，此方法產量低且昂貴。如今科學家將編碼牛凝乳酶的基因導入大腸桿菌中，實現牛凝乳酶的批量生產，極大地滿足了奶酪生產的需求。請回答下列問題：
（1）科學家利用基因工程生產出大量的牛凝乳酶，該工程是在 分子分子水平上進行設計和施工的，其核心步驟是 基因表達載體的構建基因表達載體的構建。
（2）使大腸桿菌產生牛凝乳酶的目的基因最好從 cDNA文庫cDNA文庫（填“cDNA文庫”或“基因組文庫”）中獲取，原因是大腸桿菌是原核生物，此文庫中沒有 內含子內含子，基因結構與原核細胞的基因結構更接近。
（3）利用圖示目的基因和質粒構建重組質粒，最好選用 NcoⅠ和XhoⅠNcoⅠ和XhoⅠ（填限制性核酸內切酶名稱）切割，理由是 目的基因不會被破壞、防止目的基因或載體自身的末端連接、防止目的基因與載體反向連接目的基因不會被破壞、防止目的基因或載體自身的末端連接、防止目的基因與載體反向連接。若要初步篩選出導入重組質粒的大腸桿菌，要在含 氨芐青霉素氨芐青霉素（填“氨芐青霉素”或“四環素”）的培養基中進行培養。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】分子；基因表達載體的構建；cDNA文庫；內含子；NcoⅠ和XhoⅠ；目的基因不會被破壞、防止目的基因或載體自身的末端連接、防止目的基因與載體反向連接；氨芐青霉素
【解答】
【點評】
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發布：2024/6/27 10:35:59組卷：6引用：1難度：0.7
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發布：2025/1/5 8:0:1組卷：2難度：0.6